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2. 发明申请

WO2003038438A1 VERFAHREN ZUM VERGLEICH ZWEIER PROTEINZUSTÄNDE 审中-公开
标题翻译：程序出于比较的两个蛋白质STATES
公开(公告)号：WO2003038438A1
公开(公告)日：2003-05-08
申请号：PCT/EP2002/010834
申请日：2002-09-26
申请人： MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FÖRDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V. , LOTTSPEICH, Friedrich , KELLERMANN, Josef
发明人： LOTTSPEICH, Friedrich , KELLERMANN, Josef
IPC分类号： G01N33/68
CPC分类号： G01N33/6848
摘要： Zunächst werden die freien Aminogruppen der hinsichtlich Ihrer Zusammensetzung miteinander zu vergleichenden Proteingemische (I) und (II) derivatisiert, wobei das hierzu dem Proteingemisch II zugesetzte Reagens mit einem nicht-radioaktiven schwereren Isotop markiert, das dem Proteingemisch (I) zugesetzte, ansonsten chemisch identische Reagens dagegen unmarkiert ist. Nach möglichst vollständiger Umsetzung mit dem zugesetzten Reagens werden die beiden Proteingemische zusammengeführt und gemischt, um sicherzustellen, dass alle nachfolgenden Schritte für die aus beiden Proteingemischen stammenden Proteine unter identischen Bedingungen erfolgen. Anschliessend erfolgt eine gel-elektrophoretische Trennung des erhaltenen neuen Proteingemischs in Fraktionen. Die Proteine jeder Fraktion werden jeweils einer chemischen oder enzymatischen Spaltung in Peptide unterzogen. Die erhaltenen Peptidfraktionen werden massenspektrometrisch (MS, MS/MS) analysiert. Im resultierenden Massenspektrogramm (11) sind einander entsprechende Peptide jeweils als Doppelpeaks zu erkennen. Aufgrund der Höhe der einander entsprechenden Peaks sind die zugehörigen Peptide relativ zueinander quantifizierbar.
摘要翻译：首先，相对于游离氨基它们的组成进行比较的蛋白质混合物（I）和（II）可以被衍生，其中所述蛋白混合物的目的标记II加入试剂与加入到蛋白质混合物（I）的非放射性较重同位素，化学上相同的试剂是无人盯防它。尽可能完全反应与所添加的试剂后，将两个蛋白质的混合物合并并混合，以确保所有的产品随后的步骤由相同的条件下进行的两个蛋白质的混合物的蛋白质的到来。随后，将获得新的蛋白混合物的凝胶电泳分离成各馏分。每一馏分的蛋白分别进行化学或酶裂解为肽。获得的肽级分通过质谱法（MS，MS / MS）进行分析。在所得到的质谱图（11），以分别相互识别对应肽作为双重峰。由于对应于所述相关肽的每个峰的高度相对于彼此进行定量。

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