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    • 20. 发明专利
    • 因子VII/VIIA之量產方法
    • 因子VII/VIIA之量产方法
    • TW201307382A
    • 2013-02-16
    • TW100138824
    • 2011-10-26
    • 韓美科學股份有限公司HANMI SCIENCE CO., LTD.
    • 金昌煥KIM, CHANG HWAN洪性甲HONG, SUNG KAP李炳善LEE, BYUNG SUN洪性煥HONG, SUNG HWAN權世昌KWON, SE CHANG
    • C07K14/745C12N15/85
    • C12N9/6437C07K14/745C12N15/85C12N2830/85
    • 本發明揭示一種人類凝血因子VII之量產方法。該方法包括a)建構一種表現載體,其攜帶:i)二氫葉酸還原酶啟動子,係於其富含GC之區域缺少一個或多個CCGCCC重複序列,以及與其操作性連接的二氫葉酸還原酶(DHFR)基因,及ii)巨細胞病毒(CMV)啟動子,以及與其操作性連接的人類凝血因子VII;b)將步驟a)之表現載體轉染至動物細胞株;c)在二氫葉酸還原酶抑制劑存在下培養步驟b)之經轉染之動物細胞株,以選擇高效率表現人類凝血因子VII之細胞;以及d)添加丁酸鈉至步驟c)之經選擇之動物細胞,而獲得量產人類凝血因子VII之細胞株。利用攜帶著缺少富含GC之重複序列的DHFR啟動子之載體,該方法可高效率地大規模生產人類凝血因子VII,而對於血友病之治療有貢獻。
    • 本发明揭示一种人类凝血因子VII之量产方法。该方法包括a)建构一种表现载体,其携带:i)二氢叶酸还原酶启动子,系于其富含GC之区域缺少一个或多个CCGCCC重复串行,以及与其操作性连接的二氢叶酸还原酶(DHFR)基因,及ii)巨细胞病毒(CMV)启动子,以及与其操作性连接的人类凝血因子VII;b)将步骤a)之表现载体转染至动物细胞株;c)在二氢叶酸还原酶抑制剂存在下培养步骤b)之经转染之动物细胞株,以选择高效率表现人类凝血因子VII之细胞;以及d)添加丁酸钠至步骤c)之经选择之动物细胞,而获得量产人类凝血因子VII之细胞株。利用携带着缺少富含GC之重复串行的DHFR启动子之载体,该方法可高效率地大规模生产人类凝血因子VII,而对于血友病之治疗有贡献。