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51. 发明公开

KR1020060118867A 알킬 지방산 에스터를 함유하는 식물병 방제용 조성물 失效
标题翻译：用于保护含有碱性脂肪酸酯的植物病害的组合物
公开(公告)号：KR1020060118867A
公开(公告)日：2006-11-24
申请号：KR1020050041280
申请日：2005-05-17
申请人： 한국화학연구원 , 한국생명공학연구원
发明人： 조광연 , 최경자 , 김진철 , 장경수 , 임희경 , 손정훈 , 최의성 , 이응석
IPC分类号： A01N37/02 , A01N25/02
CPC分类号： A01N37/06 , A01N25/02 , A01N25/08 , A01N37/02
摘要： A composition comprising alkyl fatty acid ester is provided to be used for efficient control of powdery mildew or rust of plants, show low toxicity on human body or domestic animal and be easily decomposed. The composition for controlling plant diseases such as powdery mildew of plants, rust or rice blast comprises an alkyl fatty acid ester selected from the group consisting of methyl or ethyl ester of C12-C18 fatty acid or a mixture thereof as an active ingredient. The composition is sprayed to plants in diluted solution form having concentration of 50 mg/l to 3,000mg/l.
摘要翻译：提供包含烷基脂肪酸酯的组合物用于有效控制植物的白粉病或锈病，对人体或家畜的毒性低，容易分解。用于防治植物病害如植物，锈病或稻瘟病的植物病害的组合物包含选自C12-C18脂肪酸的甲酯或乙酯或其混合物作为活性成分的烷基脂肪酸酯。将组合物以浓度为50mg / l至3,000mg / l的稀释溶液形式喷洒至植物。

52. 发明授权

KR100618563B1 셀룰로오스 결합 도메인을 이용한 효모에서 재조합단백질의 제조방법 失效
标题翻译：使用纤维素结合域在酵母中产生重组蛋白的方法
公开(公告)号：KR100618563B1
公开(公告)日：2006-08-31
申请号：KR1020030076056
申请日：2003-10-29
申请人： 한국생명공학연구원 , 주식회사 성운바이오 , 주식회사 이지바이오
发明人： 정준기 , 최의성 , 장형욱 , 이홍원 , 손정훈 , 안정오 , 지원철
IPC分类号： C12N15/81
摘要： 본 발명은 목적 단백질을 코딩하는 유전자의 5'-말단에 셀룰라제(cellulase)의 셀룰로오스 결합 도메인을 코딩하는 유전자가 결합된 DNA 작제물이 효모에서 작용하는 조절 서열에 작동가능하게 연결된 재조합 발현 벡터, 이 재조합 발현 벡터로 형질전환된 효모 숙주세포, 이 숙주세포를 배양하고 이의 배양물에서 셀룰로오스 결합 도메인과 융합된 목적 단백질을 분리 정제하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 상기 목적 단백질의 제조방법 및 이러한 방법으로부터 제조된 셀룰로오스 결합 도메인과 융합된 목적 단백질에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 상기 숙주세포를 배양하고 이의 배양물을 셀룰로오스 담체와 혼합하는 단계를 포함하는, 셀룰로오스 결합 도메인과 융합된 단백질이 상기 셀룰로오스 담체에 부착된 고정화 단백질의 제조방법 및 이러한 방법으로부터 제조된 고정화 단백질에 관한 것이다.
셀룰라제, 셀룰로오스 결합 도메인, 효모, 고정된 단백질

53. 发明公开

KR1020060059118A 미생물 유래의 신규 프로모터의 스크리닝 방법 失效
标题翻译：从微生物筛选新型促进剂的方法
公开(公告)号：KR1020060059118A
公开(公告)日：2006-06-01
申请号：KR1020040098303
申请日：2004-11-27
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이홍원 , 안정오 , 최의성 , 정준기 , 이은교 , 김천석 , 홍지연 , 이혁원
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/68 , C40B40/08
摘要： 본 발명은 (1) 기질 제한 배지에서 미생물을 연속 배양하는 단계, (2) 상기 미생물의 증식이 정상상태에 도달하였을 때 배양물 중 과발현된 유전자를 확인하는 단계 및 (3) 상기 유전자의 프로모터를 확인하는 단계를 포함한 미생물 유래의 신규 프로모터의 스크리닝 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 (a) 전술한 스크리닝 방법으로부터 확인된 신규 프로모터 및 목적 유전자를 포함하는 재조합 발현 벡터를 제조하는 단계, (b) 상기 재조합 발현 벡터로 숙주 세포를 형질전환 또는 형질감염시키는 단계, (c) 이렇게 형성된 형질전환체 또는 형질감염체를 배양하는 단계 및 (d) 상기 배양물로부터 상기 목적 유전자에 의해 발현된 단백질을 분리하는 단계를 포함하는 재조합 단백질의 제조방법에 관한 것이다.
기질 제한 배지, 연속 배양, 과발현, 프로모터 스크리닝

54. 发明授权

KR100475133B1 효모 표면 발현 벡터를 이용하여 변이 리파제를스크리닝하는 방법 및 신규 변이 리파제 有权
标题翻译：使用酵母表面显示载体和脂肪酶筛选具有改善的酶活性的脂肪酶的方法
公开(公告)号：KR100475133B1
公开(公告)日：2005-03-10
申请号：KR1020020055575
申请日：2002-09-13
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최의성 , 손정훈 , 김소영
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C40B40/02 , C12N9/18 , C12N15/1037
摘要： 본 발명은 효모 표면 발현벡터를 이용하여 변이 리파제를 스크리닝하는 방법 및 그 제조 산물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 리파제의 유전자를 표면 발현 벡터에 클로닝하는 단계; 2) 상기 단계 1의 발현 벡터의 리파제 유전자를 주형으로 변이 유도 PCR을 수행하여 변이 유전자를 제조하는 단계; 3) 상기 단계 2를 통해 증폭된 변이 유전자를 표면 발현 벡터와 함께 숙주세포에 형질전환시키는 단계; 및 4) 상기 단계 3의 형질전환체 표면에 발현된 변이 리파제의 활성을 측정하여 활성이 뛰어난 변이 리파제를 스크리닝하는 단계를 포함하는 변이 리파제 스크리닝 방법 및 그 산물에 관한 것이다. 본 발명의 변이 리파제 스크리닝 방법은 높은 활성의 변이 리파제를 생산하는 형질전환체를 용이하게 제조할 수 있으며, 상기 형질전환체에서 제조된 변이 리파제는 형질전환된 세포의 표면에 고정화되어 회수가 용이하고, 재생산이 가능할 뿐만 아니라 대량 생산이 가능하므로, 식품 산업, 미세 화합물 합성 및 계면 활성제 사업 등에 유용하게 사용될 수 있다.

55. 发明授权

KR100431359B1 고농도의 아스타산틴을 생산하는 돌연변이 균주 파피아로도지마 및 이 균주의 발효 배양 방법 有权
标题翻译： 고농도의아스타산틴을생산하는돌연변이균주파피아로도지마및이균주의발효배양방
公开(公告)号：KR100431359B1
公开(公告)日：2004-05-14
申请号：KR1020010001721
申请日：2001-01-12
申请人： 해태제과식품주식회사 , 한국생명공학연구원
发明人： 한지영 , 이승재 , 정명교 , 정광호 , 최의성 , 손정훈 , 심동섭
IPC分类号： C12N1/16
摘要： PURPOSE: Provided is a method for separating mutant strain, Phaffia rhodozyma (KCTC-0920B) which generates astaxanthin in a high yield in a short period of time without being degenerated into a wild type during continuous cultivations. CONSTITUTION: The method for separating mutant strain, Phaffia rhodozyma (KCTC-0920B) comprises the steps of: i) cultivating Phaffia rhodozyma (ATCC-96594) in YM broth and treating the strain with 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine (NTG) to kill 98% of yeast; ii) spreading the remaining yeast on YM medium for cultivation and selecting colonies which are growing faster with red color than the original strain; iii) repeating these processes several times and then, cultivating selected bacteria in YM broth for 4-6 days; and iv) measuring the amount of mycobiont and carotenoid and selecting the strain which produces carotenoid in a high yield.
摘要翻译：发明目的：提供一种在连续培养过程中在短时间内以高收率生产虾青素的突变株红发夫酵母（KFTC-0920B）而不退化为野生型的方法。构成：分离突变株红发夫酵母（KFTC-0920B）的方法包括以下步骤：i）在YM肉汤中培养红发夫酵母（ATCC-96594），并用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍（NTG）杀死98％的酵母; ii）将剩余的酵母铺在YM培养基上进行培养，并选择比原始菌株红色增长更快的菌落; iii）重复这些过程若干次，然后在YM肉汤中培养选择的细菌4-6天; 和iv）测量mycobiont和类胡萝卜素的量并选择以高产率产生类胡萝卜素的菌株。

56. 发明公开

KR1020040024074A 효모 표면 발현 벡터를 이용하여 변이 리파제를스크리닝하는 방법 및 신규 변이 리파제 有权
标题翻译：使用YEAST表面显示向量筛选突变的脂肪的方法
公开(公告)号：KR1020040024074A
公开(公告)日：2004-03-20
申请号：KR1020020055575
申请日：2002-09-13
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최의성 , 손정훈 , 김소영
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C40B40/02 , C12N9/18 , C12N15/1037
摘要： PURPOSE: A method for screening mutated lipase using a yeast surface display vector is provided, thereby easily preparing a transformant producing mutated lipase having improved enzymatic activity, and easily recovering the mutated lipase because the mutated lipase is fixed on the surface of the transformed cell. CONSTITUTION: A method for screening of mutated lipase using a yeast surface display vector comprises the steps of: (1) cloning a lipase gene into a yeast surface display vector; (2) carrying out mutation-inducing PCR using the lipase gene in the yeast surface display vector as a template to produce a mutated lipase gene; (3) transforming a host cell with the mutated gene and the yeast surface display vector; and (4) determining the activity of the mutated lipase displayed on the surface of the transformant to screen a mutated lipase having improved enzymatic activity, wherein the lipase gene is Candida antarctica lipase B gene having the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO: 14; and the mutated gene is Candida antarctica lipase B gene of SEQ ID NO: 14 in which leucine at amino acid position 219 and/or 278 is substituted by any other amino acid.
摘要翻译：目的：提供使用酵母表面显示载体筛选突变脂肪酶的方法，从而容易地制备产生具有改善的酶活性的突变脂肪酶的转化体，并且容易地回收突变的脂肪酶，因为突变的脂肪酶固定在转化细胞的表面上。构成：使用酵母表面显示载体筛选突变脂肪酶的方法包括以下步骤：（1）将脂肪酶基因克隆到酵母表面显示载体中; （2）使用酵母表面显示载体中的脂肪酶基因进行突变诱导PCR作为模板以产生突变的脂肪酶基因; （3）用突变基因和酵母表面显示载体转化宿主细胞; （4）测定显示在转化体表面上的突变脂肪酶的活性，筛选具有改善的酶活性的突变脂肪酶，其中所述脂肪酶基因是具有SEQ ID NO：14所示核苷酸序列的南极假丝酵母 ; 并且突变基因是SEQ ID NO：14的假丝酵母属南极脂肪酶B基因，其中氨基酸位置219和/或278的亮氨酸被任何其它氨基酸取代。

57. 发明授权

KR100371270B1 하이그로마이신 Ｂ-내성을 지배적 선별표지로 이용하는한세눌라 폴리모르파 형질전환 시스템 및 다중병렬 도입용벡터 失效
标题翻译： Hanseol-la poly-morpha转化系统和用于多平行导入的载体，其使用潮霉素B抗性作为优势选择标记
公开(公告)号：KR100371270B1
公开(公告)日：2003-02-06
申请号：KR1020000023681
申请日：2000-05-03
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이상기 , 강현아 , 최의성 , 손정훈
IPC分类号： C12N15/63
摘要： 본 발명은 메탄올 자화효모 한세눌라 폴리모르파에서 하이그로마이신 B-내성 선별표지를 이용한 신규 형질전환 시스템 및 벡터 개발에 관한 것으로, 구체적으로는 대장균 유래 하이그로마이신 포스포트랜스퍼라제(hph) 유전자를 한세눌라 폴리모르파 유전자 유래의 프로모터에 연결하여 하이그로마이신 B-내성 카세트를 제작하고 이를 한세눌라 폴리모르파 형질전환 시스템에서 지배적 선별 표지로 사용하고, 또한 항생제 내성 정도와 카피수가 비례하도록 하이그로마이신 B-내성 카세트를 제작하고 이를 다중병렬 도입용 벡터 제작에 이용하여 숙주 염색체내로 여러 다양한 카피수의 벡터가 다중병렬 도입된 한세눌라 폴리모르파 형질전환체의 선별을 용이하게 하는 기술에 관한 것이다.

58. 发明授权

KR100316741B1 파피아로도지마형질전환용벡터및그형질전환방법 失效
标题翻译：用于转化的Pupyero dosjima载体及其转化方法
公开(公告)号：KR100316741B1
公开(公告)日：2002-09-04
申请号：KR1019980046547
申请日：1998-10-31
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최의성 , 이상기 , 손정훈 , 박수동 , 이윤형 , 이승재 , 장재권 , 최석근 , 손영록
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/79
摘要： 본 발명은
파피아 로도지마 (
Phaffia rhodozyma ) 균주에 사용되는 새로운 형질전환용 벡터 및 이를 이용한 형질전환 방법에 관한 것으로서, 상세하게는
파피아 로도지마 유래의 리보좀 단백질 L41 유전자, 시클로헥시미드 (cycloheximide) 저항성 돌연변이가 유발된 L41 유전자,
파피아 로도지마 유래의 리보좀 유전자, 상기 L41 유전자 및 리보좀 유전자를 포함하는 형질전환용 벡터 그리고 이를
파피아 로도지마 균주에 일렉트로포레이션 과정으로 형질전환시키는 방법으로 구성되며, 본 발명의 벡터 및 형질전환 방법은
파피아 로도지마 를 유전적으로 안정하게 형질전환시키므로 천연색소 아스타잔틴의 산업적인 생산에 유용하게 이용될 수 있다.

59. 发明公开

KR1020020063146A 한세눌라 폴리모르파 유전자 및 이들 유전자가 결핍된 균주 失效
标题翻译： HANSENULA POLYMORPHA基因和相似基因的菌株缺失
公开(公告)号：KR1020020063146A
公开(公告)日：2002-08-01
申请号：KR1020020032934
申请日：2002-06-12
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최의성 , 이상기 , 손정훈 , 강현아 , 배정훈
IPC分类号： C12N15/57
CPC分类号： C12N9/60 , C07K14/485 , C12N15/815
摘要： PURPOSE: A Hansenula polymorpha gene and a strain lacking of the same gene are provided, thereby a foreign protein having decreased carboxy terminal digestion can be produced from the strain lacking of the Hansenula polymorpha gene. CONSTITUTION: A gene KEX1 having the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 3 and encoding carboxypeptidase alpha derived from Hansenula polymorpha DL1(ATCC 26012). A recombinant vector pKUZ is constructed by inserting Hansenula polymorpha URA3 gene pop out cassette into a plasmid pKH3.9 containing the gene KEX1 having the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 3. The Hansenula polymorpha DL1 carboxypeptidase alpha mutant strain is produced by transforming with the recombinant vector pKUZ. A foreign protein is expressed by inserting the foreign gene into the transformed mutant strain and culturing the strain in a methanol medium, wherein the foreign protein is hEGF.
摘要翻译：目的：提供汉逊酵母多形汉逊酵母基因和缺乏相同基因的菌株，从而可以从缺少汉逊酵母多形汉逊酵母基因的菌株中产生具有降低的羧基末端消化的外源蛋白质。构成：具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列并编码源自多形汉逊酵母DL1（ATCC 26012）的羧肽酶α的基因KEX1。通过将多形汉逊酵母URA3基因突变盒插入到含有具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的基因KEX1的质粒pKH3.9中构建重组载体pKUZ。多形汉逊酵母DL1羧肽酶α突变株通过用重组载体pKUZ。通过将外源基因插入转化的突变菌株中并在甲醇培养基中培养菌株来表达外源蛋白质，其中外源蛋白质是hEGF。

60. 发明公开

KR1020000028349A 파피아로도지마형질전환용벡터및그형질전환방법 失效
标题翻译： PHAFFIA RHODOZYMA的转化载体及其转化方法
公开(公告)号：KR1020000028349A
公开(公告)日：2000-05-25
申请号：KR1019980046547
申请日：1998-10-31
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최의성 , 이상기 , 손정훈 , 박수동 , 이윤형 , 이승재 , 장재권 , 최석근 , 손영록
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/79
CPC分类号： C12N15/815 , C07K14/39
摘要： PURPOSE: A vector having targeting gene and cycloheximide resistance gene is constructed for stable transformation of Phaffia rhodozyma. Electroporation method is applied to transform Phaffia rhodozyma. CONSTITUTION: Part of ribosome protein L41 gene is amplified from genome DNA of Phaffia rhodozyma and used to screen whole gene of L41 from genome library. RT-PCR is performed to clone whole L41 gene based on genomic sequence. Cycloheximide resistance is introduced by site directed mutagenesis of L41 gene in particular, proline 56 is substituted into glutamine by mutagenesis. Ribosome gene including 18S region and non-transcription sequence (NTS) is cloned from mini library. Vector pTPLR1 is constructed by ligation of 0.73kb ribosome DNA and 3.7kb L14 DNA. Vector pTPLR2 having opposite direction of L14 gene expression is also constructed. The conditions of electroporation are 0.8-1.2KV, 400-800 ohm, and 25-50 micro Farad. Southern blotting analysis reveals that the transformants are stable in cycloheximide free medium during serial passage culture for several generation.
摘要翻译：目的：构建了具有靶向基因和放线菌酮抗性基因的载体，用于稳定转化红发夫酵母。电穿孔法用于转化红发夫酵母。构成：从酵母红酵母的基因组DNA扩增核糖体蛋白L41基因的一部分，用于从基因组文库中筛选出L41的全基因。基于基因组序列进行RT-PCR克隆整个L41基因。特别是通过L41基因的定点诱变引入环己酰亚胺抗性，通过诱变将脯氨酸56代替为谷氨酰胺。包括18S区域和非转录序列（NTS）的核糖体基因从小型文库克隆。载体pTPLR1通过连接0.73kb核糖体DNA和3.7kb L14 DNA构建。还构建了具有相反方向的L14基因表达的载体pTPLR2。电穿孔条件为0.8-1.2KV，400-800欧姆和25-50微法拉。 Southern印迹分析显示，在连续传代培养中，转化体在无放线菌酮游离培养基中稳定数代。

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