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    • 36. 发明公开
    • 화학적으로 개질된 돌연변이 효소 및 이를 제조하는 방법및 스크리닝하는 방법
    • 化学修饰的突变酶,制备和筛选方法
    • KR1020010040398A
    • 2001-05-15
    • KR1020007008074
    • 1999-01-21
    • 다니스코 유에스 인크.
    • 조운즈,제이.,브라이언플레트너,에리카
    • C12P21/06
    • 본발명은 화학적으로 개질된 돌연변이 효소를 아미다제 및/또는 에스테라제 활성에 대해 스크리닝하기 위한 방법에 관한 것이다. 본 방법은 시스테인 잔기에 의해 대체된 효소로부터 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는 화학적으로 개질된 돌연변이 효소를 제공하는 것을 포함하는데, 여기서 최소한 시스테인 잔기의 일부는 시스테인 잔기 내의 티올 수소를 티올 측쇄로써 대체시키고, 화학적으로 개질된 돌연변이 효소를 아미다제에 대한 기질 및/또는 에스테라제에 대한 기질과 접촉시키고 화학적으로 개질된 돌연변이 효소가 아미다제 및/또는 에스테라제 활성을 나타내는지를 결정함으로써 개질된다. 본발명의 또한 시스테인 잔기에 의해 대체된 효소로부터 하나 이상의 아미노산 잔기를 갖는 화학적으로 개질된 돌연변이 효소 및 이를 생산하는 방법에 관한 것으로서, 하나 이상의 아미노산이 시스테인 잔기로 대체되고, 시스테인 잔기는 시스테인 잔기 내의 최소한 일부의 티올 수소를 티올 측쇄로 대체하여 화학적으로 개질된 돌연변이 효소를 형성하는 단계를 포함한다. 티올 측쇄는 -SCH
      2 (p-CH
      3 C
      6 H
      4 ), -SCH
      2 (p-OCH
      3 -C
      6 H
      4 ), -SCH
      2 (p-CF
      3 -C
      6 H
      4 ), 또는 -SCH
      2 (2,4-디NO
      2 -C
      6 H
      3 )로 구성된 그룹으로부터 선택된다.