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1. 发明授权

KR101550389B1 강제전사를 통한 메타게놈 유래 유용효소의 고효율 탐색방법 有权
标题翻译：使用强制转录从Metagenome筛选有用的酶的方法
公开(公告)号：KR101550389B1
公开(公告)日：2015-09-08
申请号：KR1020110103459
申请日：2011-10-11
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 최수림 , 나유진 , 송재준 , 이상준 , 권길광 , 김은미 , 최종현 , 권오석
IPC分类号： C12Q1/34 , C12Q1/26 , C12Q1/48 , C12N15/63
摘要： 본발명은메타게놈라이브러리로부터고효율로유용효소를탐색하는방법에관한것으로, 더욱자세하게는메타게놈유래유전자를양방향프로모터를채용한강제전사시스템을이용하여외래유전자의발현을강제적으로증가시키고, 전사조절단백질을기반으로하는재설계유전자회로와함께연계하여사용하는것을특징으로하는고효율로유용효소를탐색하는방법에관한것이다. 본발명에따르면, 기존에발현효율이낮아서목적유전자의활성을직접탐색하는데많은어려움이있었던메타게놈유래외래유전자를양방향프로모터를채용한강제전사시스템을이용하여외래유전자의발현을강제적으로증가시키고, 전사조절단백질을기반으로하는재설계유전자회로와함께연계하여사용함으로써, 목적효소에의하여생성된극미량의반응산물조차도형광및 항생제저항성등 리포터단백질의발현을통하여감지할수 있어, 고효율로목적유전자의선별및 목적유전자활성의정량측정이가능하다.

2. 发明公开

KR1020130039034A 강제전사를 통한 메타게놈 유래 유용효소의 고효율 탐색방법 有权
标题翻译：使用强制转录从元数据库筛选有用的酶的方法
公开(公告)号：KR1020130039034A
公开(公告)日：2013-04-19
申请号：KR1020110103459
申请日：2011-10-11
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 최수림 , 나유진 , 송재준 , 이상준 , 권길광 , 김은미 , 최종현 , 권오석
IPC分类号： C12Q1/34 , C12Q1/26 , C12Q1/48 , C12N15/63
CPC分类号： C12N15/1086 , C40B40/08
摘要： PURPOSE: A high efficiency detection method of metagenome-derived useful enzyme is provided to enhance the expression of a foreign gene using a forces transcription system, to sense a small amount of reactant, and to sort a target gene. CONSTITUTION: A high efficiency detection method for metagenome-derived enzyme through forced transcription comprises: a step of randomly inserting transposon into a metagenome library gene containing a gene encoding an enzyme to be detected; a step of transducing the metagenome library to a RNA polymerase-inserted host microbe and preparing a recombinant microbe library; a step of introducing a redesigned genetic circuit for sensing phenol compounds to the metagenome library; a step of treating an inducer to the recombinant microbe library and culturing; a step of treating the recombinant microbe library with a phenol releasing compound; a step of measuring and detecting activity of a reporter protein at high speed; and a step of collecting a gene of the enzyme which releases the phenol compounds from a detected microbe and performing sequencing of the gene. [Reference numerals] (AA) Redesigned genetic circuit searching system; (BB) Redesigned genetic circuit; (CC) Forced transcription introducing library; (DD) Forced transcription system; (EE) Metagenome library; (FF) Forced transcription unit;
摘要翻译：目的：提供一种高效检测方法，用于使用强力转录系统，感测少量反应物，并对靶基因进行分类，从而提高外源基因的表达。构成：通过强制转录的用于宏基因组衍生酶的高效检测方法包括：将转座子随机插入含有编码待检测酶的基因的宏基因组文库基因的步骤; 将巨基因组文库转导到插入RNA聚合酶的宿主微生物并制备重组微生物文库的步骤; 引入用于感测苯酚化合物的重新设计的遗传回路进入宏基因组文库的步骤; 将诱导剂处理至重组微生物文库进行培养的步骤; 用释放酚的化合物处理重组微生物文库的步骤; 高速测定报道蛋白活性的步骤; 以及收集从检测到的微生物释放酚化合物并进行基因测序的酶的基因的步骤。（附图标记）（AA）重新设计的遗传电路检索系统; （BB）重新设计遗传电路; （CC）强制转录引入文库; （DD）强迫转录系统; （EE）Metagenome文库; （FF）强制转录单位;

3. 发明公开

KR1020050076355A 줄기 세포로부터 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를유효성분으로 포함하는 분화 조절제 有权
标题翻译：将含有从干细胞分化到天然杀伤细胞作为有效成分的基因的基因的差异调节剂
公开(公告)号：KR1020050076355A
公开(公告)日：2005-07-26
申请号：KR1020040004308
申请日：2004-01-20
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최인표 , 강형식 , 윤석란 , 김은미
IPC分类号： C12N15/12 , A61K38/00
CPC分类号： C07K14/47 , A61K38/00 , C07K14/4702 , C12N5/0646 , C12Q1/6886 , C12Q2600/158
摘要： 본 발명은 줄기세포에서 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를 유효성분으로 함유하는 세포분화 조절제에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 줄기세포에서 전구 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를 유효성분으로 함유하는 세포분화 조절제 및 SAGE 분석방법을 통하여 상기 분화 조절 유전자를 스크리닝하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 유전자는 줄기세포에서 자연살해 세포로의 분화를 조절하는 것으로 알려져 있지 않은 신규한 유전자로, 상기 유전자는 SAGE 분석방법을 통해 손쉽게 스크리닝될 수 있고, 상기 유전자를 유효성분으로 함유하는 자연살해 세포 분화 조절제는 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.

4. 发明公开

KR1020130032217A 단백질의 재설계를 위한 허용 위치 선별 및 이를 이용한 변형된 단백질의 제조 방법 有权
标题翻译：蛋白质设计研究方法及生产改性蛋白质的方法
公开(公告)号：KR1020130032217A
公开(公告)日：2013-04-01
申请号：KR1020110105568
申请日：2011-10-14
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 이상준 , 김은미 , 김수진 , 손정훈 , 나유진 , 박순호
IPC分类号： A61K38/27 , C12N15/81 , G01N33/52 , G01N33/68 , C07K14/61 , C07K19/00
CPC分类号： A61K38/27 , C07K14/61 , C07K19/00 , C12N15/81 , G01N33/52 , G01N33/68
摘要： PURPOSE: A method for searching a permissive site for protein redesign, and a method for preparing modified protein using the same are provided to improve stability and activity of other protein therapeutic agents. CONSTITUTION: A method for searching a permissive site for protein redesign comprises: a step of preparing a target protein library with fusion protein in which folding reporter protein is inserted into various sites of the target protein; a step of selecting a colony with higher reporter protein activity than a control group; and a step of analyzing fusion protein sequences of the selected colony, and confirming a site where the folding reporter protein is inserted.
摘要翻译：目的：提供一种用于搜索重新设计蛋白质的允许位点的方法，以及使用其制备修饰的蛋白质的方法，以改善其它蛋白质治疗剂的稳定性和活性。构成：用于搜索重新设计蛋白质的允许位点的方法包括：用融合蛋白制备靶蛋白文库的步骤，其中折叠报道蛋白插入靶蛋白的多个位点; 选择具有比对照组更高的报道蛋白活性的菌落的步骤; 以及分析所选菌落的融合蛋白序列，确认插入折叠报道蛋白的部位的步骤。

5. 发明授权

KR100535326B1 줄기 세포로부터 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를유효성분으로 포함하는 분화 조절제 有权
标题翻译：分化调节剂含有调节干细胞分化为自然杀伤细胞的基因
公开(公告)号：KR100535326B1
公开(公告)日：2005-12-09
申请号：KR1020040004308
申请日：2004-01-20
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 최인표 , 강형식 , 윤석란 , 김은미
IPC分类号： C12N15/12 , A61K38/00
CPC分类号： C07K14/47 , A61K38/00 , C07K14/4702 , C12N5/0646 , C12Q1/6886 , C12Q2600/158
摘要： 본 발명은 줄기세포에서 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를 유효성분으로 함유하는 세포분화 조절제에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 줄기세포에서 전구 자연살해 세포로의 분화 조절용 유전자를 유효성분으로 함유하는 세포분화 조절제 및 SAGE 분석방법을 통하여 상기 분화 조절 유전자를 스크리닝하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 유전자는 줄기세포에서 자연살해 세포로의 분화를 조절하는 것으로 알려져 있지 않은 신규한 유전자로, 상기 유전자는 SAGE 분석방법을 통해 손쉽게 스크리닝될 수 있고, 상기 유전자를 유효성분으로 함유하는 자연살해 세포 분화 조절제는 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.

6. 发明授权

KR101752775B1 단백질의 재설계를 위한 허용 위치 선별 및 이를 이용한 변형된 단백질의 제조 방법 有权
公开(公告)号：KR101752775B1
公开(公告)日：2017-07-03
申请号：KR1020110105568
申请日：2011-10-14
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 이상준 , 김은미 , 김수진 , 손정훈 , 나유진 , 박순호
IPC分类号： A61K38/27 , C12N15/81 , G01N33/52 , G01N33/68 , C07K14/61 , C07K19/00
CPC分类号： A61K38/27
摘要： 본발명은표적단백질의효능개선을위한단백질공학기술에관한것이다. 보다구체적으로폴딩리포터단백질이표적단백질의다양한내부위치에삽입된융합단백질을갖는표적단백질라이브러리에서유전적변형, 화학적수식, 또는이종단백질융합이가능한허용위치를선별하는방법, 상기방법으로선별된허용위치에돌연변이, 화학적수식또는이종단백질융합을수행하여변형된표적단백질을제조하는방법, 상기방법에의해제조된표적단백질및 신규한변형된표적단백질에관한것이다.

7. 发明公开

KR1020130143354A 이소프렌 생합성효소 활성의 신규 탐색 및 정량방법 无效
标题翻译：检测和定量目标异丙肾上腺素生物活性酶活性的方法
公开(公告)号：KR1020130143354A
公开(公告)日：2013-12-31
申请号：KR1020120066846
申请日：2012-06-21
申请人： 한국생명공학연구원
发明人： 이승구 , 김은미 , 나유진 , 오기훈 , 최의성
IPC分类号： C12N9/00 , G01N33/68 , C12N15/63 , C12N15/52
摘要： The present invention relates to methods for detecting and quantifying isoprene biosynthesis enzyme activities and, more specifically, to methods for detecting and quantifying isoprene biosynthesis enzyme activities using a gene circuit which is capable of detecting isoprene , toluene, and benzene based compounds. By using the method for detecting enzyme activities according to the present invention, various enzyme activities can be rapidly detected and quantified with high sensitivity using sensitivity and expression adjustment of the isoprene, toluene, and benzene based compounds, and the method can be used in protein engineering for enzyme improvement. Specially, the enzyme activities can be quantitatively detected so that the method can be applied in molecular evolution. Through the present invention, trace amount such as 50 uM of isoprene can be detected with high sensitivity, analysis in cell unit, which was impossible in conventional methods, can be performed, IspS with enhanced activities can be performed through a high speed detection, and the present invention can be efficiently used in a process of detecting novel IspS genes from microorganism metagenome libraries.
摘要翻译：本发明涉及用于检测和定量异戊二烯生物合成酶活性的方法，更具体地说，涉及使用能够检测异戊二烯，甲苯和苯基化合物的基因回路来检测和定量异戊二烯生物合成酶活性的方法。通过使用根据本发明的酶活性检测方法，可以使用异戊二烯，甲苯和苯基化合物的灵敏度和表达调节来高灵敏度地快速检测和定量各种酶活性，并且该方法可用于蛋白质酶改良工程。特别地，可以定量检测酶活性，使得该方法可以应用于分子进化。通过本发明，可以高灵敏度地检测50uM的异戊二烯的痕量，以细胞为单位进行分析，这在常规方法中是不可能的，可以进行具有增强活性的IspS可以通过高速检测进行，并且本发明可以有效地用于检测来自微生物巨噬细胞库的新型IspS基因的过程。

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