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    • 4. 发明公开
    • Kernexportreportersystem
    • EP2292790A1
    • 2011-03-09
    • EP10186090.6
    • 2001-10-30
    • GENEART AG
    • Wagner, RalfGraf, Marcus
    • C12Q1/68C12Q1/70C12N5/10C12N15/10C12N15/62
    • C12N15/1051C12N15/1075C12N15/85C12N2840/44C12Q1/6897
    • Die vorliegende Erfindung betrifft Reportersysteme für den RNA-Export, Verfahren zur Suche nach Molekülen, die den RNA-Export beeinflussen und eine auf diesen Verfahren beruhende Methode zum Nachweis einer Virusinfektion.
    • 检测来自真核细胞核的RNA输出,包括制备编码报告蛋白(RP)的核酸(I),并产生可从核导出的转录物,将(I)引入细胞核,使得在 核,它可操作地连接到转录控制序列,来自(I)的转录,并确定转录物是否导出,是新的。 检测来自真核细胞核的RNA输出,包括制备编码报告蛋白(RP)的核酸(I),并产生可从核导出的转录物,将(I)引入细胞核,使得在 核,它可操作地连接到转录控制序列,来自(I)的转录,并确定转录物是否导出,是新的。 转录物的出口取决于在不存在3'-剪接受体的情况下,存在与(I),反式激活因子和任选的功能性5'剪接供体有效连接的顺式 - 活性RNA输出信号。 转录本的RP编码区段不能进行拼接。 还包括以下独立权利要求:(1)含有从野生型修饰的RP编码序列的DNA序列(II),使得与野生型不同,RNA出口发生,取决于连接的顺式作用RNA出口 元件和任选的功能性5'-剪接供体,不存在3'-拼接受体; (2)可转录形式含有(II)的真核细胞; (3)包含(II)或由其转染的细胞的试剂盒和/或(2)的细胞; (4)通过检测病毒核出口因子的活性来检测病毒感染; (5)编码荧光蛋白(FP)的DNA序列(III),其对于逆转录病毒,特别是人免疫缺陷病毒(HIV)-1至少部分密码子优化; (6)包含编码功能性5'-剪接供体和3'-剪接受体位点之间的FP的序列的DNA序列(IV) 和(7)检测真核细胞核的RNA输出,使用可以在不裂解或固定细胞的情况下检测的RP。