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    • 5. 发明公开
    • Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken
    • Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenenCystinbrücken。
    • EP0668292A2
    • 1995-08-23
    • EP95101748.2
    • 1995-02-09
    • HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT
    • Obermeier, Rainer, Dr.Gerl, Martin, Dr.Ludwig, JürgenSabel, Walter
    • C07K14/62C07K1/113
    • C07K1/1133C07K14/62C07K2319/00
    • Es wird ein Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken aus einer entsprechenden Proinsulinaminosäurekette in Anwesenheit von Mercaptan, chaotropen Hilfsstoffen und einem pH-Wert von 10 bis 11 beschrieben, sowie die direkte Umsetzung des Proinsulins zu Insulin mit Hilfe von Enzymen und direkte Isolierung des Insulins aus dem Reaktionsansatz mit Hilfe hydrophober Adsorberharze.
    • 要求的是通过使(a)式R 2 -R -B-B29-YX-Gly-A2-A20-R 3(II)的蛋白质分离正确连接的胰岛素的方法, 其中X =氨基酸Lys或Arg或具有2至35个氨基酸的肽。 肽的N-末端和羧基末端的Arg或Lys Y =氨基酸R 1 =苯基丙氨酸残基或共价键R 2 =氢,Arg或Lys,具有2至45个氨基酸的肽 。 肽的羧基末端的Arg或Lys,R 3 =氨基酸残基,A2-A20和B2至B29分别对应于人胰岛素,动物胰岛素或胰岛素衍生物的A或B链的氨基酸序列 。 与硫醇。 在等离子体辅助剂存在下,在式(II)的每个半胱氨酸残基中产生2至10个硫残基。 培养基在10至11的pH和蛋白质浓度。 0.05和0.3g / l,(b)使胰岛素原反应。 包括正确连接的胱氨酸桥梁与胰蛋白酶,胰蛋白酶样蛋白质或选择。 也与羧基肽酶B或混合物。 为产品。 正确折叠的胰岛素和(c)添加到产品。 (b)每升水溶液3〜50g疏水性吸收树脂。 培养基,pH为4〜7,(d)用吸收的胰岛素分离吸收树脂,e)洗脱胰岛素。