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    • 4. 发明申请
    • QUANTIFIZIERUNG VON NUKLEINSÄUREN
    • 核酸定量
    • WO2010103010A1
    • 2010-09-16
    • PCT/EP2010/052989
    • 2010-03-09
    • QIAGEN GMBHFANG, NanMISSEL, AndreasLÖFFERT, Dirk
    • FANG, NanMISSEL, AndreasLÖFFERT, Dirk
    • C12Q1/68
    • C12Q1/6806C12Q2521/325
    • Beschrieben wird ein Verfahren zur Quantifizierung von einer oder mehrerer Nukleinsäuren in einer Probe. Das Verfahren umfasst dabei die Schritte Bereitstellung einer Probe enthaltend mindestens eine zu quantifizierende Nukleinsäure, Zugabe einer Oligonukleotidsonde zur Probe, wobei die Oligonukleotidsonde eine Sequenz umfasst, die spezifisch an die zu quantifizierende Nukleinsäure bzw. an eine gemeinsame Sequenz der zu quantifizierenden Nukleinsäuren hybridisieren kann, Inkubation unter Bedingungen, die das Hybridisieren der Oligonukleotidsonde an die zu quantifizierende Nukleinsäure(n) erlauben, Inkubation der Probe unter Bedingungen, die die Verlängerung von hybridisierten Sonden erlauben, wobei jeweils die zu quantifizierende(n) Nukleinsäure(n) als Template dienen, Entfernung der nicht-hybridisierten Sonden aus der Probe und Quantifizierung der hybridisierten Oligonukleotidsonden als Maß für die Menge der zu quantifizierenden Nukleinsäure(n). Die Erfindung betrifft auch einen Kit zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens.
    • 公开了一种用于一个或多个核酸的样品中的量化的方法。 该方法包括提供含有至少一种核酸的样品的步骤,以进行量化,另外的寡核苷酸探针与所述样品,其中所述寡核苷酸探针包括可特异性杂交的核酸进行定量或核酸的共同序列的序列来进行定量,孵育 允许所述寡核苷酸探针杂交到量化核酸(S)的条件下,在允许杂交的探针的延伸条件,其中的每一个下孵育所述样品进行定量(n)的核酸(或多个)被用作模板,去除 从样品和杂交的寡核苷酸探针核酸的量的量度的量化非杂交探针进行定量(n)的。 本发明还涉及试剂盒,用于执行该方法。
    • 5. 发明申请
    • METHOD FOR GENERATING A STRANDED RNA LIBRARY
    • 产生经编码的RNA文库的方法
    • WO2017182578A1
    • 2017-10-26
    • PCT/EP2017/059412
    • 2017-04-20
    • QIAGEN GMBH
    • FANG, NanKREBS, WolfgangHAUPT, Isabell
    • C12N15/10
    • The invention relates to a method for preparing a strand-specific library from an nucleic acid or preferably RNA sample, for RNA comprising the steps of: (i) optionally fragmenting said RNA sample, (ii) generating a plurality of first cDNA strands by subjecting said fragmented RNA to reverse transcription by using a reverse transcriptase and first oligonucleotide primers, (iii) generating a plurality of second cDNA strands by using a DNA polymerase, second oligonucleotide primers, and the plurality of first cDNA strands, and (iv) ligating adapters to the 3' and 5' termini of the of double- stranded cDNA, (v) wherein the first cDNA strand allows no adapter ligation at its 5' terminus and said second cDNA strand allows adapter ligation at its 5' terminus, or vice versa, and, (v) optionally cloning, sequencing or otherwise using the strand-specific library. The invention also relates to a kit for preparing a strand-specific library from an RNA sample, wherein said kit comprises, (i) random oligonucleotide primers comprising a 5' terminus nucleotide which allows no adaptor ligation, (ii) random oligonucleotide primers comprising a 5' terminus nucleotide which allows adaptor ligation, (iii) optionally a reverse transcriptase for synthesizing a first cDNA strand complementary to the template RNA, (iv) optionally dNTPs, and (v) optionally a DNA polymerase
    • 本发明涉及用于从核酸或优选RNA样品制备用于RNA的链特异性文库的方法,其包括以下步骤:(i)任选地使所述RNA样品片段化,(ii)产生 通过使用逆转录酶和第一寡核苷酸引物对所述片段化的RNA进行逆转录,(iii)通过使用DNA聚合酶,第二寡核苷酸引物和所述多个第一cDNA产生多条第二cDNA链 (iv)将衔接子连接到双链cDNA的3'和5'末端,(v)其中第一个cDNA链在其5'末端不允许衔接子连接,并且所述第二个cDNA链允许衔接子连接 其5'末端或反之亦然,和(v)任选地克隆,测序或以其他方式使用链特异性文库。 本发明还涉及用于从RNA样品制备链特异性文库的试剂盒,其中所述试剂盒包含(i)包含不允许接头连接的5'末端核苷酸的随机寡核苷酸引物,(ii)随机寡核苷酸引物,其包含 (iii)任选地用于合成与模板RNA互补的第一cDNA链的逆转录酶,(iv)任选的dNTPs,和(v)任选的DNA聚合酶