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    • 6. 发明专利
    • PROCEDIMIENTO PARA LA IDENTIFICACION DE FRAGMENTOS PROTEICOS ESTIMULADORES DE CELULAS T.
    • ES2272074T3
    • 2007-04-16
    • ES99930888
    • 1999-01-15
    • KERN FLORIAN
    • VOLK HANS-DIETERWALDEN PETERSCHEFFOLD ALEXANDERBLASCZYK RAINERKERN FLORIAN
    • G01N33/50A61K38/17C07K1/02C07K1/04C07K7/06C07K7/08C07K14/045C12P21/00C12Q1/02G01N33/68
    • Procedimiento para identificar fragmentos proteicos estimuladores de células T que comprende las siguientes etapas: a) determinar la secuencia de aminoácidos de un antígeno, el cual es una proteína o un péptido, b) dividir la secuencia de aminoácidos encontrada del antígeno en fragmentos proteicos, c) sintetizar al menos un fragmento proteico con una longitud de 8 a 30 aminoácidos o escindir la secuencia de aminoácidos del antígeno en al menos un fragmento proteico con una longitud de 8 a 30 aminoácidos, siendo a este respecto el fragmento proteico una secuencia parcial de la secuencia de aminoácidos determinada del antígeno, d) incubar una suspensión que contiene células T con el fragmento o fragmentos proteicos en mezclas de reacción experimentales, e) identificar (i) al menos una citocina de célula T que fue inducida mediante el fragmento o fragmentos proteicos y sintetizada en las células T, estando a este respecto las citocinas de células T presentes en el interior de la célula o unidas a la membrana celular, y/o (ii) al menos un marcador de activación expresando o incrementando en su expresión por el o los fragmentos proteícos debido a la estimulación de las células T que fue inducido por el fragmento o fragmentos proteicos o se incrementó su expresión y se expresa en las células T, pudiendo estar presente a este respecto el marcador de activación en el interior de la célula o expresado en la superficie celular, Identificándose a este respecto la citocina o citocinas de células T o el marcador de activación por citometría de flujo y f) asignar las mezclas de reacción experimentales, en las que se estimularon las células T y se reconoció esta estimulación de células T mediante la identificación de una citocina de células T o varias citocinas de células T y/o uno o varios marcadores de activación a la secuencia o secuencias de aminoácidos de los fragmentos proteicos que se incubaron con las células T, caracterizado porque el tiempo de incubación es tan prolongado que el fragmento o fragmentos proteicos de las moléculas del MHC que se encuentran sobre la superficie celular se captan de forma suficiente, en el que la captación es suficiente cuando es posible una identificación inequívoca de células T estimuladas y porque el tiempo de incubación de la suspensión que contiene células T con el fragmento o fragmentos proteicos es tan corto que no se lleva a cabo una selección y proliferación que vaya acompañada de una eliminación dirigida de determinadas células T.