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    • 10. 发明专利
    • Integración dirigida en la localización Zp15
    • ES2654923T3
    • 2018-02-15
    • ES09836506
    • 2009-12-17
    • DOW AGROSCIENCES LLCSANGAMO THERAPEUTICS INC
    • BUTLER HOLLY JCORBIN DAVID RDOYON YANNICKGAO ZHIFANGSHUKLA VIPULA KURNOV FYODORWORDEN SARAH E
    • C12N15/05C12Q1/68
    • Un método para integrar una o más secuencias de ácido nucleico exógenas en el genoma de una célula vegetal, método que comprende: introducir la una o más secuencias de ácido nucleico exógenas en la célula vegetal, en donde las secuencias de ácido nucleico exógenas incluyen una o más regiones de homología con un gen Zp15; y romper una secuencia de cadena doble en un gen endógeno Zp15 en el genoma de la célula vegetal usando al menos una proteína de fusión que comprende un dominio de ruptura y una proteína de dedos de zinc que comprende las regiones de hélice de reconocimiento mostradas en una única fila en la Tabla 1, dando como resultado de este modo la integración de un polinucleótido que comprende la una o más secuencias exógenas en el genoma de la célula, en donde la ruptura de cadena doble se realiza (a) expresando una primera proteína de fusión en la célula, comprendiendo dicha primera proteína de fusión un primer dominio de unión de dedos de zinc y un primer semi-dominio de ruptura, en donde el primer dominio de unión de dedos de zinc ha sido diseñado para unirse a un primer sitio diana en la localización de Zp15, o en sus proximidades, del genoma de la célula vegetal; y (b) expresar una segunda proteína de fusión en la célula, comprendiendo dicha segunda proteína de fusión un segundo dominio de unión de dedos de zinc y un segundo semi dominio de ruptura, en donde el segundo dominio de unión de dedos de zinc se une a un segundo sitio diana en la localización Zp15, o en sus proximidades, del genoma de la célula vegetal, en donde el segundo sitio diana es diferente del primer sitio diana; y en donde la unión de la primera proteína de fusión al primer sitio diana, y la unión de la segunda proteína de fusión al segundo sitio diana, posicionan los semi dominios de ruptura de tal modo que se rompe el genoma de la célula vegetal en la localización Zp15, o en sus proximidades.