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    • 4. 发明申请
    • VERFAHREN ZUR ERZEUGUNG VON POLYNUKLEOTIDMOLEKÜLEN
    • 用于生产的多核苷酸分子
    • WO2003100058A2
    • 2003-12-04
    • PCT/EP2003/005308
    • 2003-05-21
    • BASF AKTIENGESELLSCHAFTMATUSCHEK, MarkusHAUER, Bernhard
    • MATUSCHEK, MarkusHAUER, Bernhard
    • C12N15/10
    • C12P19/34C12N15/1027
    • Die Erfindung betrifft Verfahren zur Erzeugung von Polynukleotidmolekülen mit veränderten Eigenschaften, wobei mindestens ein Zyklus umfassend die folgenden Schritte durchlaufen wird:(a) Bereitstellung eines doppelsträngigen Polynukleotidmoleküls oder einer Population doppelsträngiger Polynukleotidmoleküle, wobei die einzelnen Polynukleotide dieser Population mindestens einen homologen Sequenzabschnitt und mindestens einen heterologen Sequenzabschnitt besitzen,(b) Erzeugung von Einzelstrangbrüchen in den doppelsträngigen Polynukleotidmolekülen(c) nukleolytischer Abbau in 5'!3'Richtung ausgehend von den Einzelstrangbrüchen bei gleichzeitiger Neusynthese in 5'!3'Richtung unter Verschiebung der Einzelstrangbrüche in Richtung des 3'-Endes (d) Herstellung einzelsträngiger Polynukleotidmolekülen(e) Herstellung von partiell doppelsträngigen Polynukleotidmolekülen der aus Schritt (d) bereitgestellten einzelsträngigen Polynukleotidmolekülen(f) template-gerichtete Nukleinsäuresynthese ausgehend von den in Schritt (e) hergestellten partiell doppelsträngigen Polynukleotidmolekülenwobei die Schritte (b) und (c) nacheinander oder gleichzeitig ausgeführt werden können.
    • 本发明涉及一种用于生产具有改变性质的多核苷酸分子的方法,其中,至少一个循环包括通过以下步骤:(a)提供一个双链多核苷酸或双链多核苷酸分子的群体,其中,该群中的至少一个同源的序列段和至少一个异源的单独的多核苷酸 序列部分具有,(b)产生的双链多核苷酸分子的单链断裂(c)中核酸降解在5“→3”方向,同时从头合成在5从单链断裂开始“→3”方向通过在3“末端的方向移动单链断裂 单链多核苷酸分子(e)由步骤(d)制备部分双链多核苷酸分子的单链多核苷酸分子的(d)中制备提供(F)模板指导Nukleinsäures ynthesis制备从步骤(e)部分双链Polynukleotidmolekülenwobei步骤(b)和(c)起始可顺序进行或同时进行。