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71. 发明申请

WO1993021303A2 ENHANCED PURIFICATION AND EXPRESSION OF INSOLUBLE RECOMBINANT PROTEINS 审中-公开
标题翻译：增强了不溶性重组蛋白的纯化和表达
公开(公告)号：WO1993021303A2
公开(公告)日：1993-10-28
申请号：PCT/US1993003652
申请日：1993-04-16
申请人： CHIRON CORPORATION
发明人： CHIRON CORPORATION , COUSENS, Lawrence, S. , TEKAMP-OLSON, Patricia
IPC分类号： C12N01/38
CPC分类号： C12N15/8509 , A01K2217/05 , A01K2227/10 , A01K2267/03 , A61K48/00 , C07K1/1133 , C07K14/005 , C07K14/53 , C07K14/55 , C07K14/565 , C07K14/62 , C07K14/65 , C07K2319/00 , C07K2319/02 , C07K2319/50 , C07K2319/75 , C12N9/0089 , C12N15/81 , C12N15/85 , C12N15/88 , C12N15/90 , C12N2740/15022 , C12N2740/16022 , C12N2740/16222 , C12N2770/24222 , C12N2770/24243 , C12N2830/15 , C12N2830/55 , C12N2830/702 , C12P21/02 , C12Y115/01001
摘要： A method for isolating a desired protein which comprises: providing a host cell expressing the desired protein as an insoluble aggregate; culturing the host cell with an effective amount of Cu ; disrupting the host cell producing a lysate; incubating the insoluble fraction non-disulfide-bond reducing or non-copper competing chaotropic conditions to solubilize contaminants; separating the insoluble from the soluble fraction; and exposing the insoluble fraction to disulfide-bond reducing or copper competing chaotropic conditions to solubilize the desired protein.
摘要翻译：一种分离所需蛋白质的方法，包括：提供表达所需蛋白质的宿主细胞作为不溶性聚集体; 用有效量的Cu ++培养宿主细胞; 破坏宿主细胞产生裂解液; 孵育不溶性级分的非二硫键还原或非铜竞争离液序列条件以溶解污染物; 将不溶物与可溶性级分分离; 并将不溶性部分暴露于二硫键还原或铜竞争离液序列条件以溶解所需蛋白质。

72. 发明授权

KR101416143B1 신규 재조합형 인간 Ｃ형 간염 바이러스 유사 입자와 그산생 방법 有权
标题翻译：新型重组人类HEPATITIS C类病毒颗粒及其生产方法
公开(公告)号：KR101416143B1
公开(公告)日：2014-07-08
申请号：KR1020087008304
申请日：2006-09-29
申请人： 국립감염증연구소장이 대표하는 일본국 , 고에키자이단호진 도쿄도 이가쿠 소고겐큐쇼 , 도레이 카부시키가이샤
发明人： 타나베준이치 , 소네사부로 , 와키타타카지 , 이시이코지 , 스즈키료스케 , 스즈키테츠로 , 미야무라타츠오
IPC分类号： C12N15/52 , C12N15/10 , C12N7/02
CPC分类号： C12N7/00 , C12N15/86 , C12N2770/24223 , C12N2770/24243 , C12N2770/24252
摘要： 본 발명은, (i) C형 간염 바이러스주로부터 유래하는 게놈 RNA 상의, 5'비번역 영역과, NS3 단백질, NS4A 단백질, NS4B 단백질, NS5A 단백질 및 NS5B 단백질을 코드하는 염기서열과, 3'비번역 영역을 포함하는 염기서열을 포함하는 RNA 레플리콘을 자율 복제하는 세포에, (ii) 상기 (i)과 같거나 또는 다른 C형 간염 바이러스주 유래의 Core 단백질, E1 단백질, E2 단백질 및 p7 단백질을 발현시키는 벡터를 도입하고, 상기 세포를 배양하고, 산생된 바이러스 유사 입자를 회수하는 것을 포함하는 재조합형 C형 간염 바이러스 유사 입자를 산생하는 방법, 및 이 방법에 의해 산생되는 재조합형 C형 간염 바이러스 입자에 관한 것이다.
재조합형 인간 C형 간염 바이러스 유사 입자

73. 发明授权

KR101262773B1 자율복제능을 갖는 개변된 인간 Ｃ형간염 바이러스 게놈ＲＮＡ有权
标题翻译：修饰人类HEPATITIS C具有自主替代能力的病毒基因组RNA
公开(公告)号：KR101262773B1
公开(公告)日：2013-05-10
申请号：KR1020077006497
申请日：2005-08-24
申请人： 고에키자이단호진 도쿄도 이가쿠 소고겐큐쇼 , 도레이 카부시키가이샤
发明人： 와키타타카지 , 카토타카노부 , 다테토모코 , 미야모토미치코 , 바르텐슈라거랄프 , 타나베쥰이치 , 소네사부로
IPC分类号： C12N7/00 , C12N5/10 , A61K39/29 , C12Q1/68
CPC分类号： C12N7/00 , A61K48/00 , A61K2039/525 , C12N15/86 , C12N2770/24221 , C12N2770/24243 , C12N2840/203 , C12Q1/6883
摘要： 본발명은 2종이상의 C형간염바이러스의게놈 RNA의 5'비번역영역, 코어단백질코드서열, E1 단백질코드서열, p7 단백질코드서열, E2 단백질코드서열, NS2 단백질코드서열, NS3 단백질코드서열, NS4A 단백질코드서열, NS4B 단백질코드서열, NS5A 단백질코드서열, NS5B 단백질코드서열, 및 3'비번역영역을함유하는염기서열로이루어지고, 또자율복제능을갖는, 개변된 C형간염바이러스게놈 RNA를제공한다. 특히, C형간염바이러스게놈 RNA의 NS3부터 NS4, NS5A, NS5B 단백질을코드하는 RNA 서열부분을, 서열번호 1로나타내어지는 JFH1주의 NS3, NS4, NS5A, 및 NS5B 단백질을코드하는 RNA 부분서열로치환함으로써, 자율복제능을획득한, 개변된 C형간염바이러스게놈 RNA에관한것이다.

74. 发明授权

KR101122244B1 효율적으로 복제할 수 있는 변이 C형 간염 바이러스, 리포터 유전자를 포함하는 변이 C형 간염 바이러스, 상기 변이 C형 간염 바이러스를 이용한 C형 간염 바이러스 백신 제조방법 및 상기 변이 C형 간염 바이러스를 이용한 항C형 간염 바이러스 조성물의 스크리닝 방법 有权
标题翻译：包含报道基因的HEPTITIS C病毒突变体，使用其的HCV疫苗的制备方法和使用该抗体的HCV组合物的筛选方法的有效地可替代的HEPTITIS C病毒突变体
公开(公告)号：KR101122244B1
公开(公告)日：2012-03-22
申请号：KR1020097024873
申请日：2008-04-28
申请人： 포항공과대학교 산학협력단 , 주식회사 포스코
发明人： 장승기 , 김천생
IPC分类号： C12N15/51 , C12N7/01 , A61K39/29
CPC分类号： C12N15/86 , A61K39/12 , A61K48/00 , A61K2039/525 , C07K14/005 , C12N2770/24222 , C12N2770/24234 , C12N2770/24243 , G01N2333/186 , G01N2500/10
摘要： 본 발명은 리포터 유전자를 포함하는 변이 C 형 간염 바이러스, 효율적으로 복제하는 변이 C 형 간염 바이러스 및 상기 변이 C 형 간염 바이러스를 이용한 항 C 형 간염 바이러스 물질의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명은 많은 바이러스가 생성되지 않아 효율적으로 바이러스 감염을 유도할 수 없고, 바이러스의 감염의 정량적 측정이 어렵다는 기존의 HCV 세포배양법의 문제점을 극복하기 위하여 개발된 것이다. 본 발명은 많은 HCV 를 생성하고 감염을 살아있는 세포를 그대로 이용하여 효율적으로 관찰할 수 있으므로, 본 발명을 이용한 시스템에 의해, 기존의 HCV 연구에서 불가능하였던 바이러스 감염경로, 바이러스의 조립(assembly) 및 바이러스의 배출(release)에 관한 연구를 수행할 수 있고, HCV 복제 외에도 HCV 의 생활사의 다른 중요한 부분을 억제할 수 있는 억제제를 찾는 연구를 수행할 수 있다.

75. 发明授权

KR101355903B1 감염성 Ｃ형 간염 바이러스 입자 고산생계 失效
标题翻译：用于感染性丙型肝炎病毒颗粒的高生产系统
公开(公告)号：KR101355903B1
公开(公告)日：2014-01-28
申请号：KR1020087009938
申请日：2006-09-29
申请人： 국립감염증연구소장이 대표하는 일본국 , 고에키자이단호진 도쿄도 이가쿠 소고겐큐쇼 , 도레이 카부시키가이샤
发明人： 타나베준이치 , 소네사부로 , 와키타타카지 , 이시이코지 , 스즈키료스케 , 스즈키테츠로 , 미야무라타츠오
IPC分类号： C12N15/09 , C12N15/33 , C12N7/00
CPC分类号： C12N7/00 , C12N15/86 , C12N2770/24243 , C12N2770/24252
摘要： 본 발명은 감염성 C형 간염 바이러스(HCV) 입자를 산생하는 방법으로서, RNA 폴리메라아제 I 프로모터의 하류에, HCV의 5'비번역 영역 및 구조 단백질 및 임의로 비구조 단백질을 코드하는 DNA 서열과 HCV JFH1주 유래의 비구조 단백질 및 3'비번역 영역을 코드하는 DNA 서열을 포함하고, 그 하류에 RNA 폴리메라아제 I 터미네이터를 갖는 DNA 단편을 더 포함하는 발현 벡터를 HCV의 증식을 허용하는 세포에 도입하는 공정을 포함하는 방법에 관한 것이다.
c형 간염 바이러스 입자

76. 发明授权

KR101154278B1 인간 Ｃ형간염 바이러스의 전체 길이 게놈을 함유하는 핵산 구축물 및 상기 핵산 구축물을 도입한 재조합형 전체 길이 바이러스 게놈 복제세포, 및 Ｃ형간염 바이러스 입자의 제조방법 有权
标题翻译：含有人类肝炎病毒全病毒基因组的核酸构建体，重组的全长病毒基因组代谢细胞，其转运的核酸构建体和构建丙型肝炎病毒颗粒的方法
公开(公告)号：KR101154278B1
公开(公告)日：2012-06-21
申请号：KR1020067018856
申请日：2005-02-21
申请人： 고에키자이단호진 도쿄도 이가쿠 소고겐큐쇼 , 도레이 카부시키가이샤
发明人： 와키타타카지 , 카토타카노부 , 다테토모코 , 미야모토미치코 , 타나베쥰이치 , 소네사부로
IPC分类号： C12N15/83
CPC分类号： C12N7/00 , A61K2039/525 , C07K16/109 , C12N15/86 , C12N2770/24221 , C12N2770/24243 , C12N2840/203 , G01N33/5767
摘要： The present invention provides a method for replicating efficiently an RNA containing fulllength HCV genomic sequence and a method for producing HCV virus particles containing fulllength HCV replicon RNA or fulllength HCV genomic RNA by using a cell culture system. Further, the present invention relates to a method for producing hepatitis C virus particles which comprises culturing a cell, into which a replicon RNA comprising a nucleotide sequence comprising a fulllength genomic RNA sequence of hepatitis C virus of the genotype 2a, at least one selectable marker gene and/or at least one reporter gene and at least one IRES sequence or the fulllength genomic RNA of hepatitis C virus of the genotype 2a is introduced, and generating virus particles in the culture medium. Still further the present invention relates also to a hepatitis C vaccine and an antibody against hepatitis C virus particles.

77. 发明公开

KR1020100007937A 효율적으로 복제할 수 있는 변이 C형 간염 바이러스, 리포터 유전자를 포함하는 변이 C형 간염 바이러스, 상기 변이 C형 간염 바이러스를 이용한 C형 간염 바이러스 백신 제조방법 및 상기 변이 C형 간염 바이러스를 이용한 항C형 간염 바이러스 조성물의 스크리닝 방법 有权
标题翻译：包含报道基因的HEPTITIS C病毒突变体，使用其的HCV疫苗的制备方法和使用该抗体的HCV组合物的筛选方法的有效地可替代的HEPTITIS C病毒突变体
公开(公告)号：KR1020100007937A
公开(公告)日：2010-01-22
申请号：KR1020097024873
申请日：2008-04-28
申请人： 포항공과대학교 산학협력단 , 주식회사 포스코
发明人： 장승기 , 김천생
IPC分类号： C12N15/51 , C12N7/01 , A61K39/29
CPC分类号： C12N15/86 , A61K39/12 , A61K48/00 , A61K2039/525 , C07K14/005 , C12N2770/24222 , C12N2770/24234 , C12N2770/24243 , G01N2333/186 , G01N2500/10
摘要： PURPOSE: A mutant hepatitis C virus(HCV) containing a reporter gene is provided to research infection using alive cells and study virus assembly and release. CONSTITUTION: A polynucleotide containing a mutant HCV genome has JFH1 strain genome RNA E2 region or p7 region in which one or more base sequences are substituted. One or more bases among 2027th-2029th bases of sequence number 1 in E2 region are substituted with other base. The substituted 2027th-2029th bases do not encode threonine. One or more bases among 2027th-2029th bases of p7 region are substituted with other base. The substituted 2027th-2029th bases do not encode arparagine. A method for screening anti-HVC agent comprises: a step of introducing a polynucleotide containing the mutant HCV genome to a host cell under the presence of test sample and culturing the cell; and a step of evaluating anti-HCV effect of the test sample.
摘要翻译：目的：提供含有报告基因的突变型丙型肝炎病毒（HCV），以研究感染使用活细胞并研究病毒的组装和释放。构成：含有突变型HCV基因组的多核苷酸具有其中一个或多个碱基序列被取代的JFH1基因组RNA E2区或p7区。 E2区序列号1的2027〜2029碱基之间的一个或多个碱基被其他碱基取代。经取代的第2027至2029碱基不编码苏氨酸。 p7区域的第2027至2029个碱基中的一个或多个碱基被其它碱取代。取代的第2027th-2029th碱基不编码arparagine。用于筛选抗HVC药剂的方法包括：在测试样品存在下将含有突变型HCV基因组的多核苷酸引入宿主细胞并培养细胞的步骤; 以及评估测试样品的抗HCV效果的步骤。

78. 发明授权

US09175269B2 Modified human hepatitis C virus genomic RNA that can be autonomously replicated 有权
标题翻译：修饰的人类丙型肝炎病毒基因组RNA可以自主复制
公开(公告)号：US09175269B2
公开(公告)日：2015-11-03
申请号：US13734630
申请日：2013-01-04
申请人： TOKYO METROPOLITAN INSTITUTE OF MEDICAL SCIENCE , TORAY INDUSTRIES, INC.
发明人： Takaji Wakita , Takanobu Kato , Tomoko Date , Michiko Miyamoto , Ralf Bartenschlager , Jun-ichi Tanabe , Saburo Sone
IPC分类号： A61K39/29 , C12N7/02 , C12N7/00 , C12N15/86 , C12Q1/68 , A61K48/00 , A61K39/00
CPC分类号： C12N7/00 , A61K48/00 , A61K2039/525 , C12N15/86 , C12N2770/24221 , C12N2770/24243 , C12N2840/203 , C12Q1/6883
摘要： The present invention provides modified hepatitis C virus genomic RNA, comprising nucleotide sequences of genomic RNA portions of two or more types of hepatitis C viruses, which comprises a 5′ untranslated region, a core protein coding sequence, an E1 protein coding sequence, a p7 protein coding sequence, an E2 protein coding sequence, an NS2 protein coding sequence, an NS3 protein coding sequence, an NS4A protein coding sequence, an NS4B protein coding sequence, an NS5A protein coding sequence, an NS5B protein coding sequence, and a 3′ untranslated region, and which can be autonomously replicated. In particular, the present invention relates to modified hepatitis C virus genomic RNA, which can be autonomously replicated by substitution of the RNA sequence portion encoding NS3, NS4, NS5A, and NS5B proteins of hepatitis C virus genomic RNA with a partial RNA sequence encoding NS3, NS4, NS5A, and NS5B proteins of a JFH1 strain shown in SEQ ID NO: 1.
摘要翻译：本发明提供了修饰的丙型肝炎病毒基因组RNA，其包含两种或更多种类型的丙型肝炎病毒的基因组RNA部分的核苷酸序列，其包含5'非翻译区，核心蛋白编码序列，E1蛋白编码序列，p7 蛋白质编码序列，E2蛋白编码序列，NS2蛋白编码序列，NS3蛋白编码序列，NS4A蛋白编码序列，NS4B蛋白编码序列，NS5A蛋白编码序列，NS5B蛋白编码序列和3' 非翻译区域，可以自主复制。特别地，本发明涉及经修饰的丙型肝炎病毒基因组RNA，其可以通过用编码NS3的部分RNA序列替代编码丙型肝炎病毒基因组RNA的NS3，NS4，NS5A和NS5B蛋白的RNA序列部分来自主复制，NS4，NS5A和NS5B蛋白，如SEQ ID NO：1所示。

79. 发明授权

US09057048B2 Infectious hepatitis C virus—high producing HCV variants and use thereof 有权
标题翻译：传染性丙型肝炎病毒高产HCV转录因子及其用途
公开(公告)号：US09057048B2
公开(公告)日：2015-06-16
申请号：US13636904
申请日：2011-03-25
申请人： Yoshihiro Kitamura , Yoko Shimizu , Chie Aoki , Lijuan Yu , Takaji Wakita
发明人： Yoshihiro Kitamura , Yoko Shimizu , Chie Aoki , Lijuan Yu , Takaji Wakita
IPC分类号： A61K39/29 , C12N7/02 , C12N15/06 , C12N1/02 , C12N7/00 , C07K14/18 , C07K14/005
CPC分类号： C12N7/00 , A61K39/29 , C07K14/005 , C07K14/1833 , C12N2770/24221 , C12N2770/24222 , C12N2770/24243 , C12N2770/24251
摘要： An objective of this invention is to provide an HCV strain with a high capacity for virus production in a cell culture system. This invention provides a nucleic acid encoding a polyprotein precursor of the hepatitis C virus JFH1 strain having one or more amino acid substitutions, wherein the polyprotein precursor comprises at least substitution of glutamine at position 862 with arginine, as determined with reference to the amino acid sequence as shown in SEQ ID NO: 2 in the Sequence Listing.
摘要翻译：本发明的目的是提供在细胞培养系统中具有高容量病毒生产的HCV毒株。本发明提供编码具有一个或多个氨基酸取代的丙型肝炎病毒JFH1菌株的多蛋白前体的核酸，其中所述多蛋白前体至少包含第862位的谷氨酰胺与精氨酸的取代，如参照氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。

80. 发明授权

US09052321B2 Flavivirus-based system for production of hepatitis C virus (HCV) 有权
标题翻译：用于生产丙型肝炎病毒（HCV）的基于黄病毒病毒的系统
公开(公告)号：US09052321B2
公开(公告)日：2015-06-09
申请号：US13122154
申请日：2009-09-28
申请人： Bertrand Saunier , Miriam Triyatni , Edward A. Berger
发明人： Bertrand Saunier , Miriam Triyatni , Edward A. Berger
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/85 , G01N33/68 , C12Q1/68 , G01N33/576 , C07K14/005
CPC分类号： G01N33/5767 , C07K14/005 , C12N2770/24144 , C12N2770/24222 , C12N2770/24243
摘要： Provided herein is a mammalian cell transformed to contain a plasmid encoding a T7 or SP6 promoter operably linked to one or more HCV genes, a subgenomic replicon from a flavivirus and a cytoplasmic T7 and SP6 RNA amplification system. Also provided herein are isolated replication-competent HCV particles produced by the method comprising the steps of providing a transformed mammalian cell according to the first embodiment, culturing the cell, and recovering the replication-competent HCV particles from the cell culture. Provided herein are isolated HCV structural proteins produced by the method comprising the steps of providing a transformed mammalian cell according to the first embodiment, culturing the cell, and recovering the HCV structural proteins from the cell culture. Further provided herein is a system for assaying HCV entry into a cell comprising a first plasmid encoding a T7 or SP6 promoter operably linked to an HCV polynucleotide comprising at least the 5′-UTR to NS2 operably linked to an EMCV IRES in frame with an SP6 or T7 polymerase gene, respectively, a first host cell line expressing a replicon from a flavivirus and comprising a cytoplasmic T7 and SP6 RNA amplification system, a second plasmid encoding a reporter gene operably linked to both T7 and SP6 promoters in tandem, and a second host cell line comprising a cytoplasmic T7 polymerase or SP6 polymerase RNA amplification system.
摘要翻译：本文提供了转化成含有编码与一种或多种HCV基因可操作地连接的T7或SP6启动子的质粒的哺乳动物细胞，来自黄病毒的亚基因组复制子和细胞质T7和SP6 RNA扩增系统。本文还提供了通过包括以下步骤的方法产生的分离的可复制的HCV颗粒，所述方法包括提供根据第一实施方案的转化的哺乳动物细胞，培养细胞，以及从细胞培养物中回收可复制的HCV颗粒。本文提供了通过包括以下步骤的方法产生的分离的HCV结构蛋白，所述方法包括提供根据第一实施方案的转化的哺乳动物细胞，培养细胞，以及从细胞培养物中回收HCV结构蛋白。本文进一步提供用于测定HCV进入细胞的系统，其包含编码T7或SP6启动子的第一质粒，所述第一质粒可操作地连接至包含至少5'- UTR至NS2的HCV多核苷酸，其可操作地连接到具有SP6的框架的EMCV IRES 或T7聚合酶基因，表达来自黄病毒的复制子的第一宿主细胞系，其包含细胞质T7和SP6RNA扩增系统，编码与T7和SP6启动子串联可操作地连接的报告基因的第二质粒和第二个包含细胞质T7聚合酶或SP6聚合酶RNA扩增系统的宿主细胞系。

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