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    • 53. 发明公开
    • CHO-K1 CELL LINE
    • CHO-K1-ZELLLINIE
    • EP2207882A1
    • 2010-07-21
    • EP08836958.2
    • 2008-10-13
    • F. Hoffmann-La Roche AG
    • KOPETZKI, ErhardSCHWARZ, Ursula
    • C12N15/69C12N15/85C07K16/00
    • C12N15/85C07K16/18C07K16/28C07K16/2812C07K16/2854C07K16/2866C07K16/2896C07K2317/14C07K2317/21C07K2317/51C07K2317/515C12P21/00
    • The current invention reports a CHO-K1 cell, characterized in that said CHO-K1 cell is derived from CHO-K1 cell deposited as ATCC CCL-61, grows in suspension, requires no glutamine, no insulin, and no growth factors in the cultivation medium for growth, whereby said CHO-K1 cell is not modified compared to the deposited CHO-K1 cell ATCC CCL-61 cell line by the introduction, deletion, or inactivation of a nucleic acid. Also reported are a method for obtaining said CHO-K1 cell and a method for the production of a heterologous polypeptide using such a CHO-K1 cell according to the invention.
    • 本发明报道了在CHO细胞中重组产生分泌的异源免疫球蛋白的方法,其包括以下步骤:i)提供适于在悬浮培养物中生长的CHO细胞,适于在无血清培养基中生长,支原体 免费和无病毒,ii)提供包含原核复制起点的载体,赋予原核选择剂抗性的第一核酸,编码所述异源免疫球蛋白的重链的第二核酸,编码光的第三核酸 所述异源免疫球蛋白的链,赋予对真核选择剂的抗性的第四核酸,iii)转染所述CHO细胞,其中所述转染包括a)用所述载体转染所述CHO细胞,所述载体包含赋予对第一真核选择性的抗性的第四核酸 试剂,b)通过在含有所述第一种真核生物的培养基中生长来选择CHO细胞 c)用所述载体转染所述选择的CHO细胞,所述载体包含赋予与所述第一真核选择剂不同的第二真核选择剂的抗性的第四核酸,d)通过在含有所述第一和第二真核选择剂的培养基中选择生长来选择CHO细胞, 所述第二真核选择剂,iv)在所述第一和第二真核选择剂的存在下,在适于表达所述第二和第三核酸的条件下,在介质中培养所述转染的CHO细胞,和v)回收所述分泌的异源 免疫球蛋白。
    • 57. 发明公开
    • METHOD FOR THE EXPRESSION OF POLYPEPTIDES USING MODIFIED NUCLEIC ACIDS
    • VERFAHREN ZUR EXPRESSION VON POLYPEPTIDEN MIT MODIFIZIERTENNUKLEINSÄUREN
    • EP3138917A1
    • 2017-03-08
    • EP16188552.0
    • 2013-04-15
    • F. Hoffmann-La Roche AG
    • KLOSTERMANN, StefanKOPETZKI, ErhardSCHWARZ, Ursula
    • C12N15/67
    • C07K16/00C07K2317/14C12N15/67
    • Herein is reported a method for recombinantly producing a polypeptide in a cell comprising the step of cultivating a cell which comprises a nucleic acid encoding the polypeptide, and recovering the polypeptide from the cell or the cultivation medium, wherein each of the amino acid residues of the polypeptide is encoded by at least one codon, whereby the different codons encoding the same amino acid residue are combined in one group and each of the codons in a group is defined by a specific usage frequency within the group, whereby the sum of the specific usage frequencies of all codons in one group is 100 %, and wherein the usage frequency of a codon in the polypeptide encoding nucleic acid is about the same as its specific usage frequency within its group.
    • 本文报道了一种在细胞中重组产生多肽的方法,包括培养包含编码该多肽的核酸的细胞的步骤,以及从该细胞或培养基中回收多肽,其中每个氨基酸残基 多肽由至少一个密码子编码,由此将编码相同氨基酸残基的不同密码子组合在一组中,组中的每个密码子由组内的特定使用频率定义,由此具体用途的总和 一组中所有密码子的频率为100%,其中编码多肽的核酸中密码子的使用频率与其组内的特定使用频率大致相同。