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    • 37. 发明授权
    • Process for the production of peptides by way of streptavidin fusion
proteins
    • 通过链霉抗生物素蛋白融合蛋白制备肽的方法
    • US6136564A
    • 2000-10-24
    • US68738
    • 1998-06-25
    • Erhard Kopetzki
    • Erhard Kopetzki
    • C12N15/09C07K14/36C07K14/58C07K14/635C07K19/00C12N15/62A61K38/24C07K14/00C12N1/20C97H21/04
    • C07K14/58C07K14/36C07K14/635C12N15/62C07K2319/00C07K2319/22C07K2319/50C07K2319/75
    • The invention relates to a process for recombinant preparation of peptides by expression of a DNA in micro-organisms, which DNA codes for a fusion protein made of streptavidin and one of the said peptides. Streptavidin and the peptide are bound by a peptide sequence which can be cleaved by an endoproteinase. The process also includes isolation of the insoluble, inactive protein, solublisation of the inactive protein using a denaturant, dilution of the denaturant at a pH value of between 8.5 and 11 until cleaving of the fusion protein by an endoproteinase can take place, cleaving of the fusion protein, lowering of the pH value until streptavin and non-cleaved fusion protein precipitate, and cleaning of the desired peptide from the supernatant. Said process is particularly suitably for producing parathromone and urodilatin and fragments thereof.
    • PCT No.PCT / EP96 / 04850 Sec。 371日期:1998年6月25日第 102(e)日期1998年6月25日PCT提交1996年11月6日PCT公布。 出版物WO97 / 日期1997年5月22日本发明涉及通过在微生物中表达DNA重组制备肽的方法,该DNA编码由链霉抗生物素蛋白和所述肽之一制成的融合蛋白。 链霉亲和素和肽被肽序列结合,肽序列可被内蛋白酶切割。 该方法还包括使用变性剂分离不溶性无活性蛋白质,使非变性蛋白质溶解,在8.5至11之间的pH值下稀释变性剂,直到可以通过内蛋白酶切割融合蛋白,切割 融合蛋白,降低pH值直至链霉亲和素和未切割的融合蛋白沉淀,并从上清液中清洗所需的肽。 所述方法特别适用于产生相关参考物和尿嘧啶及其片段。