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    • 32. 发明专利
    • Análisis automatizado de células tumorales circulantes
    • ES2695101T3
    • 2019-01-02
    • ES12816215
    • 2012-12-28
    • VENTANA MED SYST INC
    • PESTANO GARYDITTAMORE RYANGARSHA KARLOTTER MICHAELYUN CHOLNAGY ALEXANDRA DEA
    • G01N33/574C12Q1/68
    • Un procedimiento de análisis de una muestra que contiene células tumorales circulantes (CTC) usando un instrumento automatizado, que comprende: depositar una muestra de un sujeto con cáncer de próstata sobre un sustrato configurado para su uso con el instrumento automatizado, fijar la muestra con formol al 0,4 % durante 1 a 5 minutos seguido de formol tamponado neutro (FTN) al 10 % durante 5 a 15 minutos y metanol durante 1 a 5 minutos, permeabilizar la muestra con Tween 20 al 0,2 % en solución salina tamponada con fosfato (PBS), retener al menos un 90 % de las CTC en la muestra sobre el sustrato tras la fijación y permeabilización, disponer el sustrato en el instrumento automatizado, recuperar las dianas de moléculas de proteína y ácido nucleico en la muestra, en el que la recuperación se hace mediante el instrumento automatizado, en el que la recuperación comprende: (i) poner en contacto la muestra con reactivos de identificación de CTC, en el que el contacto de la muestra con reactivos de identificación de CTC se hace mediante el instrumento automatizado, (ii) poner en contacto la muestra con sondas de ácido nucleico dirigidas al gen relacionado con ETS (ERG), homólogo de fosfatasa y tensina (PTEN) y centrómero 10 (CEN-10), en el que el contacto de la muestra con las sondas de ácido nucleico se hace mediante el instrumento automatizado, obtener imágenes de la muestra, (iii) localizar las CTC en la muestra sobre el sustrato localizando los reactivos de identificación de CTC, en el que los reactivos de identificación de CTC son reactivos inmunohistoquímicos dirigidos a una proteína CD45, una proteína citoqueratina (CQ), una proteína ERG, un receptor androgénico (RA), una proteína PSMA, o combinaciones de los mismos, en el que la localización de los reactivos inmunohistoquímicos se hace mediante el instrumento automatizado, y (iv) obtener imágenes espectrales de las CTC por localización para detectar las sondas de ácido nucleico, en el que la obtención de imágenes espectrales de las CTC se hace mediante el instrumento automatizado, y analizar la muestra analizando las imágenes espectrales y los reactivos de caracterización de CTC detectados.
    • 34. 发明专利
    • METHOD AND SYSTEM FOR ASSESSING STAIN QUALITY FOR IN-SITU HYBRIDIZATION AND IMMUNOHISTOCHEMISTRY
    • CA2981155A1
    • 2016-12-01
    • CA2981155
    • 2016-05-25
    • VENTANA MED SYST INC
    • GARSHA KARLOTTER MICHAELSTEVENS BENJAMINTAFT JEFFERSONVENTURA FRANK
    • G06K9/00G01N1/30
    • Immunohistochemistry (IHC) and in situ hybridization (ISH) have the aim of detecting, localizing and quantifying certain analytes for various diagnostic purposes. The quality of the stains which are analyzed may deviate for various reasons. Therefore, the present invention provides a method and system for assessing the stain quality and for establishing objective criteria for assessing the stain quality for application in the fields of in-situ hybridization and immunohistochemistry. In one possible embodiment, the invention comprises the steps of unmixing multi-spectral image data of a tissue specimen to obtain analyte intensity images, each analyte intensity image comprising signals from a single stain, computing metrics based on the analyte intensity images, wherein the metrics are uniformity, distribution and/or dispersion of pixel intensity values in the analyte intensity images and assessing a stain quality of a slide by comparing the computed metrics to pre-determined cutoff values regarding uniformity, distribution and/or dispersion of pixel intensity, wherein the stain quality of the slide is assessed as acceptable if the computed metrics meet or exceed the pre-determined cutoff values, and wherein the stain quality of the slide is assessed as unacceptable if the computed metrics do not meet the pre-determined cutoff values. In order to establish objective criteria for assessing stain quality, in one possible embodiment, the method and system includes the step of deriving cut-off values for uniformity, distribution and/or dispersion of pixel intensity by combining the computed metrics based on the analyte intensity images with pre-established data quantifying the stain quality.