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    • 23. 发明专利
    • Adiciones al código genético de aminoácidos reactivos artificiales
    • ES2773664T3
    • 2020-07-14
    • ES14171211
    • 2004-04-16
    • SCRIPPS RESEARCH INST
    • DEITERS ALEXANDERCROPP ASHTON TCHIN JASON WANDERSON CHRISTOPHER JSCHULTZ PETER
    • G01N33/53A61K38/17C12N20060101C12N5/00C12N9/00C12N9/16C12N15/67C12N15/85C12P21/06
    • Una composición que comprende una célula eucariota, célula que comprende un anticuerpo o un fragmento de anticuerpo, en la que: (i) el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo comprenden al menos un aminoácido artificial que comprende un grupo reactivo para la unión de una molécula mediante una reacción de cicloadición [3 + 2] y en donde el al menos un aminoácido artificial se incorpora al anticuerpo o al anticuerpo fragmento in vivo en la célula eucariota mediante una aminoacil ARNt sintetasa ortogonal (O-RS) y un par de ARNt ortogonal; o (ii) el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo comprende al menos un aminoácido artificial que comprende un primer grupo reactivo incorporado mediante una O-RS y un par de ARNt ortogonal y al menos una modificación postraduccional, en donde la al menos una modificación postraduccional comprende la unión de una molécula que comprende un segundo grupo reactivo mediante una reacción de cicloadición [3 + 2] al al menos un aminoácido artificial que comprende un primer grupo reactivo, y en donde: (a) la O-RS, o una porción de la misma están codificada por una secuencia polinucleotídica como se expone en una cualquiera de las SEQ ID NO: 20-35; (b) la O-RS comprende una secuencia de aminoácidos como se expone en una cualquiera de las SEQ ID NO: 48-63; o (c) la O-RS comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos un 90 % idéntica a la de la tirosilaminoacil-ARNt sintetasa (TyrRS) natural de SEQ ID NO: 2 y comprende las siguientes sustituciones aminoacídicas: valina, isoleucina, leucina, glicina, serina, alanina o treonina en una posición correspondiente a Tyr37 de SEQ ID NO: 2; y treonina, serina, arginina, asparagina o glicina en una posición correspondiente a Asp182 de SEQ ID NO: 2, y opcionalmente comprende además una o más de las siguientes sustituciones aminoacídicas: aspartato en una posición correspondiente a Asn126 de SEQ ID NO: 2; metionina, alanina, valina o tirosina en una posición correspondiente a Phe183 de SEQ ID NO: 2; y serina, metionina, valina, cisteína, treonina o alanina en una posición correspondiente a Leu186 de SEQ ID NO: 2.