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    • 20. 发明专利
    • PROCEDE DE PREPARATION DE PEPTIDES PAR ASSEMBLAGE DE MULTIPLES FRAGMENTS PEPTIDIQUES
    • CA2826877A1
    • 2012-08-23
    • CA2826877
    • 2012-02-15
    • CENTRE NAT RECH SCIENTUNIV LILLE 1 SCIENCES & TECHNOLOGIES
    • MELNYK OLEGOLLIVIER NATHALIEMHIDIA REDADHEUR JULIEN
    • C07K1/00C07K1/02C07K1/107
    • Procédé de préparation d'un assemblage peptidique de n fragments et de n-1 acides aminés portant une fonction thiol, représenté par la formule (I) : A1-C1-A2-A3-... -Ci-1-Ai-...-Cn-1-An dans laquelle A1, A2, A3... Ai.., An sont des fragments peptidiques, C1, C2, C3... Ci-1...Cn-1 sont des restes d'acides aminés portant une fonction thiol, n est compris entre 3 et 50, et i est 2 à n, dans lequel on prépare un peptide-thioester de formule : A1SR (I I) dans laquelle A1 est un fragment peptidique et SR est le reste d'un thioester alkylé, R étant alkyle éventuellement substitué, à partir d'un bis(2-sulfanyléthyl)amino peptide : A1-SEAoff dans laquelle SEAoff est groupement bis(2-sulfanyléthyl)amino cyclique, par action d'un thiol R-SH, en présence d'un réducteur de disulfures cycliques, suivie de la condensation sur un fragment peptidique de structure : H-C1(SR')-A2-SEAoff (III) dans laquelle (SR') représente un reste disulfure sur le thiol de l'amino-acide C1, en présence d'un thiol aromatique ArSH, puis transforme le nouveau peptide obtenu, de structure :A1-C1-A2- SEAoff (IV), en un peptide-thioester de formule : A1-C1-A2-SR (II'), par action d'un thiol R-SH, en présence d'un agent réducteur de disulfures cycliques, et condense sur un fragment peptidique de structure H-C2(SR')-A3-SEAoff (??I') en présence d'un thiol aromatique ArSH, pour donner un fragment peptidique, de structure A1-C1-A2-C2-A3-SEAoff (IV') et réitère ces 2 opérations jusqu'à n-2 fois, pour obtenir un fragment peptidique de structure A1-C1-A2-C2-A3-... -Ci-1-Ai-....-Cn-2-An-1-SEAoff (IVm), puis met en uvre une réaction de ligation native de ce fragment peptidique (IVm) obtenu, avec un peptide de formule : H-Cn-1-An (Vn) par réduction en présence d'un agent réducteur de disulfures cycliques, pour donner l'assemblage peptidique multiple de formule générale (I).