基本信息:
- 专利标题: 생물학적 시료중의 물질을 검출하는 방법
- 专利标题(英):Method for detecting substance in biological sample
- 专利标题(中):生物样品中检测物质的方法
- 申请号:KR1020117025225 申请日:2010-03-31
- 公开(公告)号:KR1020120003903A 公开(公告)日:2012-01-11
- 发明人: 타카쿠라요시미츠 , 오카나오미 , 콘도카즈히로
- 申请人: 니뽄 다바코 산교 가부시키가이샤
- 申请人地址: 일본 도쿄도 미나도쿠 도라노몽 *-*-*
- 专利权人: 니뽄 다바코 산교 가부시키가이샤
- 当前专利权人: 니뽄 다바코 산교 가부시키가이샤
- 当前专利权人地址: 일본 도쿄도 미나도쿠 도라노몽 *-*-*
- 代理人: 특허법인원전
- 优先权: JPJP-P-2009-087839 2009-03-31
- 国际申请: PCT/JP2010/055887 2010-03-31
- 国际公布: WO2010114031 2010-10-07
- 主分类号: G01N33/68
- IPC分类号: G01N33/68 ; G01N33/543 ; C12N15/63 ; C07K17/00
본 발명의 방법은,
1) 비오틴 결합성 단백질을 결합시킨 담체, 및, 검출해야 할 물질과 특이적으로 결합하는 단백질에 비오틴을 결합시킨 비오틴화 단백질을 준비하고;
2) 공정 1)에서 준비한 담체에 비오틴화 단백질을 결합시켜, 비오틴화 단백질이 결합한 담체를 작성하고;
3) 공정 2)에서 작성한 비오틴화 단백질이 결합한 담체에,
(a) 생물학적 시료, 및
(bi) 공정 1)의 비오틴 결합성 단백질 등을 발현시키는데 이용한 숙주 세포와 동종의 세포로부터 조제한 세포파쇄 추출액과 비오틴 결합성 단백질, 혹은
(b-ii) 공정 1)의 비오틴 결합성 단백질 등을 발현시키는데 이용한 숙주 세포와 동종의 세포에 유전자 공학 기술에 의해 비오틴 결합성 단백질을 발현시킨 세포로부터 조제한 세포파쇄 추출액
을 혼합하여 첨가한다; 그리고,
4) 비오틴화 단백질과 특이적으로 결합한 피검물질을 검출하는
것을 포함한다.
The present invention relates to a method of detecting a substance in a biological sample, the carrier to be used in the methods, and kits.
The method of the invention,
1) preparing the biotinylated protein was coupled to biotin binding proteins by combining the biotin-binding protein, a carrier, and, as specific substance to be detected enemy;
2) combine the biotinylated protein to the carrier prepared in step 1), and creates the carrier is biotinylated protein bound;
3) Step 2) combining a biotinylated protein created by the carrier,
(A) a biological sample, and
(Bi) Step 1) of the biotin-binding protein, such as using sikineunde expressing host cells and disrupted cell extract prepared from cells of the same type and biotin-binding protein, or
(B-ii) Step 1) a biotin binding protein, such as the expression host cells using sikineunde with biotin coupled by a genetic engineering technology to the same kind of cell protein extracts prepared from cell disruption in which the cell expressing the
It is added and mixed; And,
4) for detecting a test substance bound to the biotinylated protein-specific
It includes.