基本信息:
- 专利标题： 一种高效表达磷脂酶D的方法及应用
- 申请号：CN202411100911.1 申请日：2024-08-12
- 公开(公告)号：CN118931874A 公开(公告)日：2024-11-12
- 发明人： 史劲松 , 张鹏 , 龚劲松 , 孔晓丽 , 苏畅 , 李恒 , 许正宏
- 申请人： 江南大学
- 申请人地址： 江苏省无锡市通沙路898号南楼七层
- 专利权人： 江南大学
- 当前专利权人： 江南大学
- 当前专利权人地址： 江苏省无锡市通沙路898号南楼七层
- 代理机构： 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)
- 代理人： 王莎莎
- 主分类号： C12N9/16
- IPC分类号： C12N9/16 ; C12N15/75 ; C12N15/63 ; C12N15/55 ; C12N1/21 ; C12P7/6481 ; C12R1/125
摘要：
本发明涉及一种高效表达磷脂酶D的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过表达元件共优化策略，实现了磷脂酶D的高效分泌表达，胞外酶活达到4055.9U/mL，相较于未改造菌株，酶活提高了43.6倍。本发明还根据此表达体系，通过整合位点筛选和多拷贝整合策略，首次实现了磷脂酶D的整合表达，整合菌株胞外酶活达到392.9U/mL。本发明的磷脂酶D具有良好的催化活性，能在水相条件下以大豆卵磷脂为底物高效合成磷脂酸。重组菌株酶活稳定性好、发酵周期短、催化效率高，为大规模工业化生产奠定了基础，表明该菌株在磷脂类衍生物的生物合成领域具有潜在应用价值。同时，整合菌株避免了发酵过程中抗生素的添加，拓宽了菌株的应用范围。