基本信息:
- 专利标题： 一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3-M6、M7、M8、M9和应用
- 申请号：CN202310199723.8 申请日：2023-03-05
- 公开(公告)号：CN116814593A 公开(公告)日：2023-09-29
- 发明人： 秦星 , 王宵 , 罗会颖 , 姚斌 , 王亚茹 , 黄火清 , 柏映国 , 苏小运 , 王苑 , 涂涛 , 张杰 , 王晓璐 , 张红莲 , 于会民
- 申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 申请人地址： 北京市海淀区圆明园西路2号
- 专利权人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 当前专利权人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 当前专利权人地址： 北京市海淀区圆明园西路2号
- 代理机构： 北京法信智言知识产权代理事务所
- 代理人： 高宇
- 主分类号： C12N9/58
- IPC分类号： C12N9/58 ; C12N15/57 ; C12N15/81 ; C12N1/19 ; C12R1/84
摘要：
发明涉及基因工程和蛋白质工程领域，具体涉及一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M6、7、8、9和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，分别将loop18区域优化后的突变体ThAPT3‑M2、α8‑helix区域优化后的突变体ThAPT3‑M4和loop19区域优化后的突变体ThAPT3‑M5分别进行双区域叠加和三区域叠加，产生了四个突变体。突变体的Tm值提高了7.2℃、4.3℃、5.7℃、7.5℃，55℃下的t1/2分别提高到亲本的10.6倍、6.9倍、8.5倍、12.2倍，60℃下的t1/2分别提高到亲本的21.2倍、13.2倍、17.6倍、39.7倍。突变体M6、M7、M8和M9的比活力相较于亲本分别提高了23％、25％、20％和62％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。