基本信息:
- 专利标题： 一种AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系及其构建方法与应用
- 申请号：CN202211324850.8 申请日：2022-10-27
- 公开(公告)号：CN116064542A 公开(公告)日：2023-05-05
- 发明人： 刘军 , 郑雯 , 钟亚丹 , 杨斌
- 申请人： 南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心)
- 申请人地址： 广东省广州市麓景路2号
- 专利权人： 南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心)
- 当前专利权人： 南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心)
- 当前专利权人地址： 广东省广州市麓景路2号
- 代理机构： 广州凯东知识产权代理有限公司
- 代理人： 曾志环
- 优先权： 2022108368181 20220715 CN
- 主分类号： C12N15/113
- IPC分类号： C12N15/113 ; C12N15/12 ; C12N15/85 ; C12N5/10
摘要：
本发明公开了一种AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系及其构建方法与应用，步骤包括：构建sgRNA表达质粒、打靶Donor载体，将sgRNA质粒、Cas9质粒和打靶Doner载体共同电转H9人胚胎干细胞系，镜下观察并挑选并验证，得到AAVS1:Brainbow敲入的人胚胎干细胞系。本发明优点包括：结合CreERT2/Loxp技术可以在该细胞系上对特定的细胞群进行标记，并在人胚胎干细胞3D培养分化过程中实现对单细胞的谱系追踪，用于在类器官水平研究胚胎干细胞到成体细胞分化和发育过程。