基本信息:
- 专利标题： 一种细胞外RNA文库的构建方法及其应用
- 申请号：CN202111596366.6 申请日：2021-12-24
- 公开(公告)号：CN115109835A 公开(公告)日：2022-09-27
- 发明人： 杨学敏 , 张燕菲
- 申请人： 广州表观生物科技有限公司
- 申请人地址： 广东省广州市黄埔区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器A407号房间
- 专利权人： 广州表观生物科技有限公司
- 当前专利权人： 广州表观生物科技有限公司
- 当前专利权人地址： 广东省广州市黄埔区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器A407号房间
- 代理机构： 北京超凡宏宇专利代理事务所
- 代理人： 王忠宝
- 主分类号： C12Q1/6806
- IPC分类号： C12Q1/6806 ; C12Q1/6869 ; C40B40/06 ; C40B50/06
摘要：
本发明提供了一种细胞外RNA文库的构建方法及其应用，涉及高通量测序以及文库构建技术领域。本发明的细胞外RNA文库的构建方法包括：(a)裂解体液样本；(b)加入含有标签序列的磁珠捕获样本中的RNA；(c)逆转录；(d)以第一链cDNA为模板，合成第二链cDNA；(e)获得的第二链cDNA经去核糖体RNA后PCR富集获得全转录组检测文库。该方法专门针对细胞外RNA的检测，不需要提取RNA，不需要通过特异性磁珠捕获mRNA的3’端的PolyA尾巴，直接裂解生物体液后用带barcode磁珠捕获RNA，实现高效、快速获得多种类型的文库，尤其在样本稀缺的情况下，有效实现样本的多种体液中的细胞外RNA测序。