基本信息:
- 专利标题： 一种m6A修饰的新生RNA捕获及文库构建方法
- 申请号：CN202210919993.7 申请日：2022-08-01
- 公开(公告)号：CN115044647A 公开(公告)日：2022-09-13
- 发明人： 尹世刚 , 张锦玥 , 江勇 , 彭建华
- 申请人： 西南医科大学附属医院
- 申请人地址： 四川省泸州市太平街25号
- 专利权人： 西南医科大学附属医院
- 当前专利权人： 西南医科大学附属医院
- 当前专利权人地址： 四川省泸州市太平街25号
- 代理机构： 成都明涛智创专利代理有限公司
- 代理人： 梁月钊
- 主分类号： C12Q1/6806
- IPC分类号： C12Q1/6806 ; C40B50/06
摘要：
本发明公开了一种m6A修饰的新生RNA捕获及文库构建方法，属于生物技术领域。其捕获方法主要包括新生RNA标记和m6A修饰的新生RNA捕获步骤，其中，新生RNA标记过程包括对RNA进行体外转录，所述转录过程加入试剂包括5‑乙炔基尿苷，转录后提取RNA，采用点击化学技术对新生的RNA进行生物素标记，纯化回收后收集得到样品。采用两轮特异性磁珠对m6A修饰的新生RNA进行捕获。超声打断RNA，打断后采用包被m6A抗体的磁珠捕获m6A修饰的RNA；采用链霉亲和素磁珠从m6A修饰的RNA产物中捕获新生RNA产物。本发明能够监控全基因组范围内新生RNA发生m6A修饰过程，以及m6A对新生转录本的调控过程。