基本信息:
- 专利标题： 一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用
- 申请号：CN202110715607.8 申请日：2021-06-28
- 公开(公告)号：CN113444744A 公开(公告)日：2021-09-28
- 发明人： 焦顺昌 , 张嵘 , 宋文静 , 袁翰
- 申请人： 北京鼎成肽源生物技术有限公司
- 申请人地址： 北京市昌平区双营西路86号院4号楼1至5层1单元101
- 专利权人： 北京鼎成肽源生物技术有限公司
- 当前专利权人： 北京鼎成肽源生物技术有限公司
- 当前专利权人地址： 北京市昌平区双营西路86号院4号楼1至5层1单元101
- 代理机构： 北京高沃律师事务所
- 代理人： 苏士莹
- 主分类号： C12N15/85
- IPC分类号： C12N15/85 ; C12N15/66 ; C12N5/10 ; C12N5/0783 ; C07K14/725 ; C07K14/54
摘要：
本发明提供了一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用，涉及生物医药技术领域。本发明在mRNA的模板上采用一种线性化质粒，省略线性化步骤；在模板中预先加入PolyA121结构，舍去额外的加尾工作；采用ARCA抗反帽的帽子类似物，在体外转录过程中同时完成加帽。总之，本发明通过特殊的反应体系和特殊线性化质粒模板，将mRNA的体外转录简化为一步。本发明减少了mRNA的降解，大大降低了对NK细胞的刺激性和毒性；帽子类似物大大提高了mRNA的稳定性，降低了NK细胞炎性反应。本发明利用制备得到的mRNA在NK细胞上可成功过表达细胞因子或人工抗原嵌合受体。