基本信息:
- 专利标题： 一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用
- 申请号：CN201810748064.8 申请日：2018-07-10
- 公开(公告)号：CN109136254B 公开(公告)日：2021-06-04
- 发明人： 张翠英 , 肖冬光 , 李凭 , 王建辉 , 郭学武 , 陈叶福 , 董健 , 杜丽平 , 马立娟 , 于爱群
- 申请人： 天津科技大学
- 申请人地址： 天津市滨海新区经济技术开发区第13大街9号
- 专利权人： 天津科技大学
- 当前专利权人： 天津科技大学
- 当前专利权人地址： 天津市滨海新区经济技术开发区第13大街9号
- 代理机构： 天津盛理知识产权代理有限公司
- 代理人： 赵瑶瑶
- 主分类号： C12N15/81
- IPC分类号： C12N15/81 ; C12N1/19 ; C12R1/865
摘要：
本发明公布了一种在酿酒酵母中高效无痕敲除的方法，并通过对该无痕基因敲除系统中的正向同源序列、半乳糖浓度及半乳糖诱导时间进行优化，第二步同源重组的概率达到6.86×10‑4。以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株，BAT2基因为靶基因，实现对野生酿酒酵母菌株基因BAT2高效的无痕敲除，通过白酒发酵实验，改造菌株的正丙醇、异丁醇和异戊醇含量亲本菌株相比分别降低了20.32％、47.85％和23.14％，达到了低产高级醇的目的。该方法可广泛应用于酵母及其他微生物的基因改造，由于所获得的突变株不残留任何外源基因，可以安全的用于工业生产，为直接在工业菌株中进行基因敲除提供了有益的参考。
公开/授权文献:
- CN109136254A 一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用 公开/授权日：2019-01-04